高考生物选修3知识点总结.docVIP

高考生物选修知识点总结 基因工程 基因工程的基本工具 1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） 功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2、“分子缝合针”——DNA连接酶 两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4—DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端； T4DNA连接酶能缝合两种末端，但效率较低。 3、“分子运输车”——运载体 （1）载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存。② 具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③ 具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是:质粒它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 基因工程的基本操作程序 目的基因的获取 从基因文库中获得、人工合成、PCR扩增。人工合成目的基因的常用方法有_和_。（了解基因组文库和CDNA文库） 基因表达载体的构建组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。 （3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 将目的基因导入受体细胞_ 常用的转化（导入）方法： 导入植物细胞：农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。 导入微生物细胞：感受态细法。先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常用的原核细胞是大肠杆菌重组细胞导入受体细胞后，筛选含基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 目的基因的检测和表达 检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。 检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。 检测目的基因是否翻译成蛋白质，提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。 有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质） 专题2 细胞工程 植物细胞工程 1理论基础（原理）：2、植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞→愈伤组织→试管苗→植物体 （2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 （3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 3、植物体细胞杂交技术 诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法用聚乙二醇（PEG）作诱导剂。 意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 动物细胞工程 1动物细胞培养 （）取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 （）细胞贴壁悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。接触抑制细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，会停止分裂增殖。 （）动物细胞培养需要满足以下条件 ①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 ②营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。需加入血清、血浆等天然成分。 ③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。 ④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2作用是维持培养液的pH。 2动物体细胞核移植技术和克隆动物 （1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。 （2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多