桑黄菌丝液体培养及多糖提取工艺优化研究报告.docVIP

第一篇 桑黄菌丝培养及多糖提取工艺优化 第1章 绪论 1.1 前言 桑黄是目前国际公认的抗肿瘤效果最好的大型真菌之一，巴西蘑菇即姬松茸与其疗效相近。由于用于一般化学疗法的抗癌剂的毒性强，对癌症患者正常体细胞也具有杀伤作用，而桑黄多糖则几乎没有毒性，其通过提高机体免疫能力，杀伤癌细胞，这是真菌多糖抗癌的一大优点。桑黄多糖能明显提高患者的免疫能力，当与一般的抗癌化学疗法并行使用时，可以进一步提高治疗效果。因此桑黄的研究以及开发利用越来越热[1]。 桑黄最早在日本及韩国得到开发利用，现已开始小批量人工栽培。由于天然的桑黄数量非常稀少，难以成为稳定的工业产品来源，韩国一制药公司已率先开发出桑黄菌丝体培养法新技术，人工生产桑黄活性物质，并将其提取物用冻干法加工成粉末。由于抗癌效果显著，桑黄提取物干粉在韩国市场的售价高达每克2000多美元。日本一家专门从事生药加工的医药企业“津村株式会社”将人工培植的桑黄子实体加工成“破壁细胞超微粉末”，生产的“桑黄”(超微)粉末胶囊每瓶(288粒)售价高达3万日元。据统计，仅日、韩两国市场2002年各种桑黄剂的销售额合计已逾100亿日元。美国在本世纪初开始从日本进口桑黄制剂作为膳食补充剂在本土销售。 我国吉林省延吉市凭借独有的地域优势，现已开发出复合桑黄口服液，主要销往日本及韩国，在当地也有一定的消费市场。根据目前所掌握的资料，由于外商需求量大，价格高，致使国内各产地进行掠夺性开采，子实体孢子无法大量形成。结果造成该资源在东北地区已经难觅踪影，西北也即将枯竭。再加上我国天然的桑黄数量本来就非常稀少，子实体的人工栽培尚处于起步阶段，所以要想形成稳定的医药工业产品来源，就必须充分挖掘桑黄的自然资源，深入开展桑黄的人工栽培；另外还要进行菌种的分离培养，利用现代生物技术进行深层发酵。同时，应进一步测定桑黄提取物中的有效成分，探索其与菌种、菌龄以及培养条件的关系，确定桑黄有效成分在提高人体免疫机能、疾病的预防和治疗等方面的作用机制，使桑黄能够早日应用于人类的医疗保健事业[2]。 1.2 简介桑黄 1.2.1桑黄的名称及分类 桑黄（Phellinus igniarius、Phellinus linteus和Phellinus baumi）别名：火木层孔菌、针裂蹄（裂蹄）和鲍氏层孔菌。桑黄菌是一种多年生珍稀药用真菌，属担子菌纲(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceae)，木层孔菌属(Phellinus)[3]。桑黄子实体中等至较大，无柄。菌盖半球形，剖面扁平至马蹄形，深烟色至黑色，有同心纹和环棱，初期有微细绒毛，后变光滑、稍龟裂，硬而木质化，2~12cm×3~21cm，厚1.5~10cm，边缘锐或钝，其下侧无子实层。菌肉深咖啡色、锈褐色或浅咖啡色，厚2~7mm。桑黄生于杨、柳、桦、桃等阔叶树的枯立木及立木上及树干上[4]。固因其着生树种不同，分为桑树桑黄、杨树桑黄和桦树桑黄等品种。其中，桑树桑黄子实体入药最佳。 1.2.2桑黄的分布 桑黄主要分布于中国、日本、菲律宾、澳大利亚、北美、中南美等地。在国内，桑黄分布于河北、山西、内蒙古、黑龙江、吉林、台湾、河南、广东、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、四川、云南等地，即集中分布区在黑龙江省东部乌苏里江与兴凯湖之间，西北地区陕西与甘肃交界的“子午岭”自然保护区，国外主要在日本、韩国、俄罗斯等国家分布。 1.3 桑黄的研究进展 1.3.1桑黄药用功能的研究进展 （1）抗肿瘤作用 桑黄的抗癌功能最早被日本学者等发现，研究表明桑黄野生子实体的提取物对小鼠肉瘤180的抑制率为96.7%。研究还表明具有抗癌作用的物质是桑黄子实体中的多糖。 （2）提高免疫力 Hwan-Mook KIM等用P.linteus的菌丝体胞外多糖（EPS）进行免疫学实验，发现EPS不仅能够使T细胞增殖，而且对不同同类抗原的T细胞也有增殖作用，并且毒性T淋巴细胞的毒性在加桑黄胞外多糖（EPS）后大大增强。Yun-HeeShon等发现桑黄提取物可以诱导相解毒酶包括苯醌氧化还原酶（QR）和谷胱甘肽-S转移酶（GST）的活性，并且提高了谷胱甘肽的水平。 张万国[5]等对桑黄子实体提取物对人外周血单个核细胞（PMNCs）产生C-干扰素（IFN-C）的研究表明桑黄具有诱生IFN-C的能力，能显著增高小鼠的血清IFN-C水平，有利于其发挥调节机体免疫力，抑制肿瘤细胞增殖的作用。 （3）抗突变作用 Shon[6]等用桑黄提取物的抗突变实验中发现，提取物可有效的抑制诱变剂对沙门氏菌的诱变作用。 （4）抗血管生成试验 Yun-SeonSong等在小鸡胚胎绒膜尿囊膜（CAM）试验中，发现随桑黄提取物加量的增加抑制效果增加，说明提取物有较好的抗血管生成活性。 （5）