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第9章：吸光光度法 特点 灵敏度高 最低浓度一般可达1-10-3%的微量组分。对固体试样一般可测到10-4%。如果对被测组分事先加以富集，灵敏度还可以提高1-2个数量级。 准确度较高 相对误差为2-5%，但对微量成分来说，还是比较满意的，因为在这种情况下，滴定分析法和重量法也不够准确了，甚至无法进行测定。 操作简便，测定速度快 应用广泛 几乎所有的无机离子和有机化合物都可直接或间接地用吸光光度法进行测定。 ◇光的基本性质 光的波粒二象性 单色光、复合光、光的互补 吸收光谱 当一束平行单色光通过任何均匀、非散射的固体、液体或气体介质时，一部分被吸收，一部分透过介质，一部分被器皿的表面反射。如图6-3所示，设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透过光强度为It，反射光强度为Ir。 在吸光光度分析法中，试液和空白溶液分别置于同样质料及厚度的吸收池中，然后让强度为I0的单色光分别通过这两个吸收池，再测量其透过光的强度。此时反射光强度基本上是不变的，且其影响可以相互抵消。入射光强与吸收和透过光强关系为下式: 透过光强度It与人射光强度Io之比称为透射比或透光率（度），用T表示。 溶液的透射比愈大，表示它对光的吸收愈小; 相反，透射比愈小，表示它对光的吸收愈大。 吸光系数 Absorptivity 小结： a，ε与c或A无关 εmax≥104L? mol-1 ? cm-1 用光度法测定具有较高的灵敏度 εmax≤103L ? mol-1 ? cm-1不宜用光度法测定 第二节 分光光度计及吸收光谱 定性分析与定量分析的基础 第三节 显色反应及其影响因素 3.多元络合物 试样中存在干扰物质会影响被测组分的测定，使得标准曲线严重偏离朗伯-比尔定律 消除方法 1）控制溶液酸度 2）加入掩蔽剂 3）改变干扰离子的价态 4）选择合适的参比溶液 5）增加显色剂用量:存在耗显色剂的离子时 6）分离 三、 吸光度测量的误差 　仪器测量误差 若测A时产生微小的绝对差dA， 则相对误差Er为： Er=dA/A； ∵A=εbc 当b一定时，两边微分得：dA=εbdc ∴ dA/A=dc/c=Er 透射比的读数误差。光度计的读数标尺上透射比T的刻度是均匀的，故透射比的读数误差ΔT（绝对误差）与T本身的大小无关，对于一台给定仪器它基本上是常数，一般在0.002-0.01之间。 第五节 其他吸光度法 三、 双波长分光光度法 双光束光度计：折光器将一束光分成两束，分时交替地照射样品池（克服光源不稳定而引起的测量误差） 1.双波长光度法作用原理： 单波长吸光光度法：采用双光束光路，用溶剂或空白溶液作参比调零位 四、导数分光光度法 导数分光光度法是利用自动电路对光谱进行求导，其导数信号与浓度成正比，即 第六节 吸光光度分析法的应用 一、 痕量金属分析 对痕量金属元素的定量分析是吸光光度法的一个重要应用领域； 几乎所有的金属离子都能与特定的化学试剂作用形成有色化合物，通过吸光光度法可对金属离子进行测定。 二、 临床分析 三、食品分析 　　原理：以稍低于待测组分浓度的标准溶液作为参比溶液，然后测试液的吸光度，再从A求c，从而提高准确度．参比液 cS cX样品液 　　则 AS = εb cS AX= ε b cX 　　A=△A相对= AX--AS =εb(cX--cS)=εb△c相对 　　用cS参比液调“0”，而后测A值，实际是试样与参比之差△A，与两者的浓度差△c成正比 　　　　　故：cX = cS + △cX 高浓度示差吸光光度法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 方法 定量原理 相对误差 常规法 示差法 ∴ Tr Tx ∵ I0 Is 有 结论：示差法提高了准确度 示差吸光光度法的误差 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for