(精)微观技术课程1 Microsoft PowerPoint 演示文稿.pptVIP

微观技术 马玉堃 生命科学学院 2007年3月 * 绪论——显微镜在生物学中的应用 显微镜发明300多年来，通过不断地改进，它的装置和性能都得到不断改善，并且出现了适应于不同需要的各种特殊显微镜。如能观察活细胞的相差显微镜；既能作形态观察，又能作定性分析的荧光显微镜；作为定量研究的干涉显微镜；用于双折射研究的偏光显微镜；根据量子力学中的隧道效应设计而成，迅速提高生物大分子、超导材料及表面科学等领域研究水平的扫描隧道显微镜；20世纪80年代发展起来的新一代科技产品，现代形态学、细胞分子生物学、遗传学、神经科学、药理学、材料学及地质学等领域中强有力的研究工具之一——激光扫描共聚焦显微镜等等。光学显微镜技术虽然是经典的技术，然而它还在不断发展之中，所以迄今仍是研究生物学和其他科学的重要手段。 光学显微镜分辨率由于受照明光线波长的限制，理论上其最小分辨距离为0.2um，实际上能清晰看到的最小物体直径约为0.5 um 大小。而电子束的波长很短，电子显微镜最小分辨距离可达到0.1nm(1A)，相当于原子的大小。所以，自从1933年世界上第一架电子显微镜问世之后，大大促进了生物的微观世界研究水平的提高。除了透射电镜之外，还发展了扫描电镜、高压电镜以及很多的衍生技术，如负染技术、胶体金免疫标记技术、大分子(核酸)电镜技术、复型和冷冻蚀刻技术、电镜放射自显影技术及电镜酶细胞化学技术等。这就推进了对细胞超微结构和分子结构的研究。 尼康E-600显微镜 尼康E800荧光DIC显微镜 激光共聚焦扫描显微镜 莱卡倒置显微镜 JEM-1011透射电子显微镜 莱卡超薄切片机 JEOL扫描电子显微镜 图2-3 落射式照明原理 暗视野照明方式 相差显微镜照明原理 光学显微镜、TEM、SEM成像原理比较 荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色） 一种介壳虫的染色体（PCM照片） DIC显微镜下的硅藻（伪彩色） 内质网透射电镜图（伪彩色） 冰冻蚀刻电镜照片 第一章 显微镜 第一节 显微镜的种类 分为光学与非光学 单式与复式 1 单式 最简单的显微镜，通常的放大镜。10倍以下，只有一个透镜。构造稍微复杂的是解剖显微镜，200以下，由几个透镜组成。扩大镜的原理如图1-1。 眼睛在F’处观察，就可以看到放大的像。 2 复式 实验室常用的，结构比较复杂，倍数比较高，由2组以上透镜组成。复式显微镜主要有三部分组成，目镜、物镜和集光器。复式显微镜种类很多，除了一般常用的明视野显微镜外，还有各种类型的显微镜，如暗视野、相差、偏光、荧光等。 图1-2 复式显微镜光路图 *