仪器分析教案给学生..docVIP

课 程 教 案 课程名称： 仪器分析实验 任课教师 欧丽娟，刘开建，张德春 所属院部： 材料与化学工程学院 教学班级： 化工1201-04班 教学时间：2014 —2015 学年第 二 学期 湖 南 工 学 院 实验 高效液相色谱法测定苯酚和苯 一、实验目的 1．掌握高效液相色谱法测定苯酚和苯的方法； 2．了解流动相流速对色谱分离的影响。 二、实验原理 酚类属于高毒物质，主要污染源是炼油、木材防腐及某些工厂的工业废水。人体摄入一定量酚类物质后，会出现急性中毒，长期饮用被酚类污染的水可引起头昏、贫血及神经系统障碍。因此，酚类物质被列为环境优先控制的污染物。酚类化合物种类繁多，如甲酚、氯酚、硝基酚、氨基酚等。由于取代基位置和取代基数目睥不同又分为对甲酚、间甲酚、邻甲酚、2，4，6-三甲酚等，不同的酚地人体的毒害作用不同，容量法和分光光度法测得的是总酚含量，液相色谱将分离和测定结合成来，可对各种不同的酚类物质进行定量测定。 本实验采用十八烷基硅烷键合相为固定相，甲醇-水溶液为流动相分离苯酚和苯混合物，因固定相的极性小于流动相的极性，此法称为反相液液相色谱法。当两组分在固定相和流动相中分配时，极性大的物质在流动相中的溶解度较大，而极性小的物质在流动相中的溶解度较小，组分的流出顺序是极性大的化合物在前，极性小的化合物在后。 三、仪器和试剂 主要仪器：高效液相色谱仪；2. 色谱柱：15 cm × 4.6 mm，KR100-C18，10 ?m；3. 0.45 ?m有机相滤膜；4. 1 mL注射器；5. 标准进进针头1． 甲醇：色谱纯；2. 超纯水：使用前过滤；3. 苯酚、苯混合液：3 ?L苯酚、4 ?L苯溶于10 mL甲醇-水（85：15）中。四、实验步骤 开机 按操作规程开机，并使仪器处于工作关态。色谱条件如下： 流动相：甲醇-水（85：15，体积比）；流速：1.0 mL/min, mL/min； 检测波长254 nm；柱温30 ℃；进样量20 ?L。 试样测定 首先设定流速为1.0 mL/min，待基线稳定后，进样测定；然后把流速改为mL/min，待基线稳定后，再次进样测定。 关机 实验完毕后，清洗色谱柱，关机。 、 论g 根据不同流速下所得各组分的保留时间和半峰高宽计算塔板数和分离度。N = (tR/?)2 = 16(tR)2/W = 5.54(tR/W1/2)2 其中：W——峰宽；?——曲线拐点处峰宽的一半，即峰高0.607处峰宽的一半；W1/2——半峰高宽；tR——保留时间。 R = 2(tR2—tR1)/(W1+W2) tR——保留时间；W——峰宽。 一般说当R＜1时，两峰有部分重叠；当R=1.0时，分离度可达98%；当R=1.5时，分离度可达99.7%。通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。R≥1.5称为完全分离。、思考题 1若降低甲醇含量，保留时间tR和分离度是否有改变？如何变化？ 2根据实验的色谱条件判断各组分的流出顺序。 教学后记 实验 气相色谱法测定苯一、实验目的 1． 2． 二、实验原理 三、仪器和试剂 1 1）天美GC-8A型气相色谱仪色谱工作站2）进样口: 毛细柱进样口 (S/SL)。 3）检测器：TCD检测器4）色谱柱：PEG-6000/6201，Φ4×2m。 5）5ul微量注射器。 2．气体：高纯N2 (99.999%)，载气流速：0mL/min。 3、药品：苯、 甲苯 、二甲苯。 四、实验步骤 2气源的状态及压力，然后打开气源，检漏。 2. 按下列条件设置参数： 柱箱温度：10℃； 进样器温度（或气化室温度）：10℃；检测器TCD温度：10℃。 3. 开启电脑中的工作站程序及色谱仪。15min后设置桥流：80mA。升温结束，待基线平稳后，即可进样。 4．用微量注射器准确抽取0.5μL溶液，注射入进样口。注意不要将气泡抽入针筒。进样的同时，用鼠标点击工作站上的“”绿色按钮开始记录图谱，储存并处理图谱数据。 若想在设定的“采集时间”前终止实验，可用鼠标点击工作站上的。 五、思考题 1 2、如何确定各组分的含量？ 教学后记 实验 火焰原子吸收光谱法测定水中钙含量（4学时） 一、实验目的 1、了解原子吸收光谱仪的构造及使用方法。 2、了解火焰原子吸收分光光度法分析原理。 3、掌握标准曲线法测定元素含量的分析技术。 二、实验原理 原子吸收光谱