强噪声暴露所致耳蜗带状体突触损失与修复解析.pptVIP

强噪声暴露所致耳蜗带状体突触损失与修复 周丹丹、梁金子、德吉措姆、央吉、黄郑丽 实验目的 确定强噪声暴露对耳蜗结构和功能的影响; 探究强噪声暴露对的耳蜗IHC-SGN之间带状体突触结构损伤的程度与听觉功能建立的关系; 实验对象 成年豚鼠,给予120dB SPL白噪声暴露2h。 自由饮食进水，饲养室恒温（18-24℃）恒湿(55%)。 噪声后1天，1天,1周，1个月测试听觉功能，观察与对照组之间的差别。 功能测试结束后，取耳蜗进行形态学观察。 实验步骤 一、各组将实验动物豚鼠在噪声下暴露一天，一周，一个月。 二、对照组进行ABR测量。 三、各组在噪声暴露后对豚鼠进行ABR/CAP的测量。 1.豚鼠腹腔注射巴比妥钠麻醉。 2.在豚鼠的两耳后及头顶正中连上电极，打开音源。 3.测量豚鼠的ABR。 四、将老鼠处死。 五、取出老鼠两耳蜗，进行固定。 六、形态学观察，对各组动物进行ribbon计数。 实验结果 噪声前后各组动物平均ABR阈值 1000 2000 4000 8000 16000 32000 噪声前 26.67 27.67 28.67 29.67 30.67 31.67 噪声后1天 70.83 65 65 67.5 75 72.5 噪声后1周 60 61.43 63.57 60.71 52.86 70.71 噪声后1月 52.5 47.5 54.17 51.47 40 65.83 实验分析 听觉阈值的升高（阈移）是判断听觉损伤和制定噪声安全标准的主要依据听觉阈值不同程度的升高对应听觉相应程度的损伤。本实验中由图表一可知，噪声后一天，一周，一个月豚鼠ABR阈值较噪声前均有不同程度的增高，表示有不同程度损伤。噪声后一天ABR阈值增高最为明显，提示噪声一天后豚鼠听力损伤最为严重。噪声后一周，一个月ABR阈值依次比噪声后一天的ABR阈值低，说明噪声后时间越久损伤的程度越轻。 噪声前后各组ribbon计数结果 CtBP2染色 0 0.1KHz 0.25KHz 0.5KHz 1KHz 2KHz 4KHz 8KHz 16KHz 24KHz 32KHz 噪声前 14.355 1517161615.425 17181716 噪声后1天 9.459469697 10111212137.75 109.427777778 9.761363636 噪声后1周 1010.49 12.12 12.4525 13.3525 10.0175 9.7 1010.89 10.29 噪声后4周 1010.1030303 13121311109.605263158 9.684848485 9.751515152 平均数 11111313131211121111不引起永久性听觉阈移的低强度噪声，在成年动物损伤耳蜗内毛细胞和I型螺旋神经节细胞（SGN）之间的突触（ribbon synapse）和SGN退行性死亡。 本实验中通过ribbon计数来表示损伤的恢复程度，两者成正比关系。由图表二可知，在相同频率的噪声下，噪声后一天，一周，一个月的ribbon计数较噪声前均有不同程度的下降，说明耳蜗带状体突触均受到损伤。但一个月后的ribbon计数相比噪声后一天、噪声后一周的ribbon计数略有回升，说明随着时间推移耳蜗带状体突触损伤有部分恢复。 本实验的优点在于展示了强噪声暴露所致耳蜗带状体突触损失与修复的动态过程，比较清晰易懂。不足之处在于尚未能具体量化出造成损伤的具体噪声量及损伤的具体程度。 * * * * *