基因工程复习知识点..docxVIP

质粒名称和大小、复制启动子、多克隆酶切位点MCS、选择标记基因16°C连接，37°C酶切凝胶电泳pH8.0带负电基因工程：又称遗传工程，是通指重组DNA技术的产业化 设计和应用的流程。 强调基因克隆、载体构建、遗传转化、性状表达与产品提取及纯化等全部过程。基因操作技术：利用遗传重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，将包含目的基因、特殊载体在内的各种必需元件的DNA分子经过改造和重组后，转入另一受体生物细胞内。基因：DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列。核酸：由许多核苷酸单位通过3，5-磷酸二酯键连接起来形成的不含侧链的具有方向性的长链状化合物。顺反子（基因同义词）：在反式构型中不能互补的各个突变型在染色体上所占的一个区域称为一个顺反子。是一个必须保存完整才具有正常生理功能的遗传物质最小单位。突变子（muton）：突变单位，基因内部有许多突变位点，突变后产生变异的最小单位。（最小的突变单位为1个碱基对bp）重组子（recon）：重组单位，基因内部有多个重组单位，不能由重组分开的最小单位。一个基因不是一个突变单位，也不是一个重组单位。断裂基因（split gene）：指基因内部被一个或更多不翻译的编码顺序即内含子所隔裂。基因都可划分为转录区（转录起始点至转录终止子的区域）和调控区（位于转录起始点5’上游，包括核心启动子、上游启动元件及增强子等序列）结构基因并非都是连续的，原核生物基因是连续的，而真核生物的基因是断裂的内含子（intron）：在成熟mRNA的片段中未反应出的DNA区段；外显子（extron/exon）: DNA序列中被转录成为mRNA中的片段。基因中能变成核苷酸序列的是外显子，内含子不能。核小体（nucleosome）：在真核生物中，双螺旋的DNA分子围绕一蛋白质八聚体进行盘绕，从而形成特殊的串珠状结构。核小体结构属于DNA的高级结构。核小体是染色体的基本结构单位。重叠基因（overlapping gene）：两个或两个以上的基因共有一段DNA序列的现象。转座子（Transposon）：又名转位子、跳跃基因（jumping gene）是一类DNA序列，它们能够在基因组中通过转录和逆转录，或在内切酶（Nuclease）的作用下，在其他基因座上出现。转座子的发现，证明了基因组并不是一个静态的集合，而是一个不断在改变自身构成的动态有机体。同源重组： 是指发生在DNA同源序列之间的重组。 位点特异性重组：指发生在特异序列之间的重组，仅见于噬菌体的基因组整合到细菌染色体中的过程。 转座重组：是指不依赖于序列间的同源性而使一种DNA顺序插入另一种DNA顺序中的重组，因此转座是一种可在染色体的不同区段或不同染色体之间广泛发生的重组。又称为复制重组。基因组：是指细胞内遗传信息的携带者DNA的总体。组蛋白（histones）：是指染色体中的碱性蛋白质，其特点是富含二种碱性氨基酸（赖氨酸和精氨酸）。PCR（Polymerase Chain Reaction）：聚合酶链式反应的简称。PCR技术是一种在体外高效快速扩增特定基因或DNA序列的方法。电泳：带电颗粒在电场作用下向着与其电荷相反的电极移动的过程。载样缓冲液（loading buffer）：待电泳的样品在点样前与之相混合的一种缓冲液。载体（vector）：能携带外源基因进入受体细胞的运载工具，且有完整的复制（及转录）功能的DNA大分子。克隆载体（cloning vector）：主要是对目的基因克隆，有复制子即可表达载体（expression vector）：能使目的基因在宿主细胞中表达的一类载体，既有复制子，更要有强启动子穿梭载体（shuttle vector）：既可在原核细胞中复制，也可在真核细胞中扩增和表达质粒（plasmid）：存在于微生物染色体外的小型环状双链DNA分子，基因工程技术中应用最广泛、功能最强大、最易操作的载体。不相容性：同一细胞内不能同时存在两种质粒穿梭质粒载体（shuttle plasmid vector）：由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞存活和复制的质粒载体Ampr（氨苄青霉素抗性）Tetr（四环素抗性）MCS：载体上供外源基因插入的、具有多个RE单一酶切位点的片段，一般为人工拼接而成回文结构（palindrom）：以切割序列正中作为轴心，反转对称；同一单链以中心轴对折可形成互补双链。平末端：在识别序列的对称轴上进行切割；粘（黏）性末端：在识别序列的两个对称点切割，产生末端带有单链尾巴的切口；同裂酶：不同的RE有相同的识别特点，但切割位点不一定相同;同尾酶：不同RE识别不同序列,但切割后能产生相同的粘性末端，可以连接起来; 酶单位（U）：在最适反应条件下1小时完全消化lμg标准DNA所需的酶量为1个单