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第六章 蛋白质的生物合成 Protein Biosynthesis (翻译) 概念:以mRNA为模板合成蛋白质的过程。 将模板(mRNA)中的遗传密码转变为蛋白质中的氨基酸排列顺序 翻译进行部位:细胞质 (复制、转录部位在细胞核) 第一节 参与蛋白质生物合成的物质 1、原料:20种基本AA。 2、RNA(mRNA、tRNA、rRNA) 3、酶:氨基酰-tRNA合成酶、转肽酶等 4、蛋白质因子: ①起始因子eIF(原核生物为IF); ②延长因子EF; ③释放因子(释放因子eRF;核糖体释放因子RR)。 5、供能物质: ATP GTP 6 、无机离子: Mg2+ K+ 蛋白质的合成体系 氨基酸 (20种) 一、mRNA 〈一〉mRNA的作用: mRNA携带DNA的遗传信息决定多肽链AA的排列顺序。 〈二〉原核与真核生物的mRNA作为模板的区别 原核mRNA:一条mRNA往往为功能相关的几种蛋白质编码。 (多顺反子) 真核mRNA: 一条mRNA中一般只带有一种蛋白质的编码信息。(单顺反子) (三)遗传密码(密码子)概念 mRNA分子上,从5’ → 3’,每3个相邻的碱基构成三联体,分别代表某种氨基酸或肽链合成的起始或终止信号,这种三联体称为遗传密码(genetic codon)。 遗传密码共有43=64种, UAA、UAG、UGA 终止密码。 AUG 起始密码 代表Met。 2. 简并性(degeneracy) 密码子与反密码子的摆动配对 遗传密码的特点: 连续性 简并性 摆动性 通用性 方向性:指阅读mRNA模板上的三联体密码时,只能沿5’→3’方向进行。 有起始密码(AUG)和终止密码(UAA,UAG,UGA) (四)阅读框 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框(open reading frame, ORF)。 二、tRNA 功能:1.携带氨基酸 2.辨认密码子 一种tRNA只能与一种氨基酸结合,一种氨基酸可与几种tRNA结合。 结合位点为:3`端CCA-OH。 书写方法: tRNAala Ala-tRNAala 起始tRNA tRNAimet Met-tRNAimet 延长tRNA tRNAemet met-tRNAemet 原核生物起始tRNA fmet-tRNAfmet: 三、rRNA (一)核蛋白体组成与结构 rRNA 小亚基 核蛋白体 多种蛋白质 一、氨基酸的活化和转运 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proof-reading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法: Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 二、肽链的合成(一)起始 多肽链合成的延长阶段由一循环反应过程来完成,每次循环增加一个氨基酸残基。 在翻译起始复合体形成的基础上,活化氨基酸在核蛋白体上反复翻译mRNA上的密码并缩合生成多肽链的循环反应过程,称为核蛋白体循环。 核蛋白体循环包括多肽链合成的进位、成肽和转位三步反应。 核蛋白体沿mRNA链滑动,不断使多肽链延长,直到终止信号进入A位。 1.识别:eRF识别终止密码,进入核蛋白体的A位。? 2.水解:eRF使转肽酶变为酯酶,多肽链与tRNA之间的酯键被水解,多肽链释放。 3. 脱离:模板mRNA、eRF以及空载tRNA与核蛋白体脱离。? 多肽链合成终止演示 (三)终止 释放因子(eRF) eRF1、eRF3 eRF1可以识别3种终止密码子UAA、UAG和UGA。 eRF3是一种GTP结合蛋白,eRF3.GTP与 eRF1协同作用促进肽链C端与tRNA3‘-OH酯键的水解,从而释放新生肽链。 三、翻译后加工 新生肽链不都具有生物活性,有些肽链还需要进行修饰,才能成为有活性的成熟蛋白质。这一过程称为翻译后加工。 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性,必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 主要包括: 多肽链折叠为天然的三维结构肽链; 一级结构的修饰; 高级结构修饰。 新
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