普通微生物学第六章课件.ppt

3、抗生素（antibiotic） 抗生素：某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或影响它种生物的生命活动，如杀死微生物或抑制其生长。 自上世纪40年代以来，已找到上万种新抗生素，合成了近10万种半合成抗生素，但其中在临床上常用的仅有几十种。 1）作用机制： 抑制细菌细胞壁的合成 破坏细胞质膜 作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化 抑制蛋白质和核酸的合成 抑制微生物的生长或杀死它们 青霉素 青霉素的β-内酰胺环结构与D-丙氨酸末端结构相似，从而能占据丙氨酸的位置与转肽酶结合，并将酶灭活，肽链之间无法相互连接，抑制了细胞壁的合成。 由于不同微生物之间的细胞化学结构和代谢的差异，不同的抗生素抗菌谱各异。 2）细菌抗药性的产生 抗性菌株的特点： 细胞质膜透性改变，使抗生素不能进入细胞或进入后被细胞主动排出； 药物作用靶改变； 合成了修饰抗生素的酶； 抗性菌株发生遗传变异，导致合成新的多聚体，以取代或部分取代 原来的多聚体； 一、控制微生物的物理因素 杀死或抑制微生物的物理因素 温度 辐射作用 过滤 渗透压 干燥 超声波 1、温度 当温度超过微生物生长的最高温度或低于生长的最低温度都会对微生物产生杀灭作用或抑制作用。 温度愈高，十倍致死时间愈短 高温使蛋白质、核酸等重要生物大分子发生变性、破坏，以及破坏细胞膜上的类脂成分，导致微生物死亡。 D值大小还与微生物的种类、生长时期、检测培养基的性质等有关。 高温的杀菌时间与样品中的微生物浓度有关。 当微生物的浓度一致时，可以通过比较热致死时间长短来衡量不同微生物的热敏感性。 1）干热灭菌 干热灭菌 烘箱内热空气灭菌 火焰灼烧 160℃,2h 2）湿热灭菌 湿热比干热灭菌更好： 更易于传递热量； 更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件： 多数细菌和真菌的营养细胞：在60℃左右处理5-10分钟； 酵母菌和真菌的孢子：用80 ℃以上温度处理； 细菌的芽孢：121 ℃处理15分钟以上。 （1）巴斯德消毒（pasteurization） （2）煮沸消毒 （3）间歇灭菌（fractional sterilization OR tyndallization） （4）常规高压灭菌（autoclaving） （5）连续加压灭菌（continuous autoclaving） 135-150 ℃，5-15秒，工业上发酵培养基 135-150 ℃，2-6秒，牛奶或其它液态食品 （超高温灭菌） 60-85 ℃处理15秒至30分钟 121℃ ，15分钟 115℃ ，30分钟 棉花、玻璃纤维或石棉 滤膜 核孔 2、过滤作用 空气和不耐热的液体培养基的灭菌 3、辐射作用 辐射灭菌（radiation sterilization）是利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物体上的微生物的一种有效方法。 4、高渗、干燥、超声波等 抗微生物剂 非选择性 选择性 （对所有细胞都有毒性） （对病原微生物毒性强） 消毒剂（disinfectant） 防腐剂（antiseptics） 抗代谢物 抗生素 中草药有效成分 化学治疗剂 * * 二、同步培养 理想的实验材料： 群体细胞能处于同一生长阶段，同时进行分裂的生长。 同步生长 同步培养 （synchronous culture）： 使群体中的细胞进行同步生长的培养技术 通过同步培养的方法获得的细胞称为同步细胞或同步培养物 参见P138 机械法 环境条件控制技术 离心法 过滤分离法 硝酸纤维素滤膜法 温度 培养基成分控制 其他（如光照和黑暗交替培养） 同步培养物：一种理想的材料 生理与遗传特性研究 工业发酵的种子 由于细胞的个体差异，同步生长往往只能维持2-3个世代，随后又逐渐演变为随机生长。 三、连续培养 将微生物置于一定体积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获。 分批培养（batch culture）或封闭培养（closed culture） 培养基一次加入，不予补充，不再更换。 迟缓期、对数期 稳定期、衰亡期 连续培养（continuous culture） 在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。 在培养过程中不断地补充营养物质和以同样的速率移出培养物是实现微生物连续培养的基本原则。 控制连续培养的方法 恒浊器连续培养 恒化器连续培养 不断调节流速，使培养液浊度保持恒定 保持恒定的流速 （一）恒浊器连续培养 测定所培养微生物的光密度值 自动调节新鲜培