[2012年生物化学考前辅导班PPT.pptVIP

名词解释：化学渗透学说 是目前最有说服力的解释氧化磷酸化作用机理的学说，电子传递释放出的自由能驱动H＋从线粒体基质跨过内膜进入到膜间隙（膜外×），从而形成跨线粒体内膜外高内低的H＋电化学梯度。当H＋通过FOF1-ATP合酶回流进入线粒体基质时生成ATP 问答：以原核生物为例，阐述蛋白质的生物合成过程。（10’） 答：蛋白质的合成亦称翻译，可分为四个阶段： 1. 氨基酸的活化→氨酰tRNA（2’） 2. 大肠杆菌中肽链合成的起始 （3’） mRNA上的SD序列可与小亚基上16SrRNA的3’进行碱基配对，在起始因子的参与下先形成30S起始复合物，再形成70S起始复合物（70S-mRNA-fMet·tRNAfMet）。 3. 多肽链的延长（3’） 在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位，转肽和移位三个步骤。重复进位、转肽、移位，肽链沿N→C方向延伸。 4. 翻译的终止及肽链的释放 （2’） 锦上添花：新生肽链的折叠与后加工 蛋白质合成的机理 氨基酸的活化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAiMet的形成 氨酰- tRNA合成酶特点 原核生物多肽链的合成过程 肽链合成的起始 某些原核生物mRNA中蛋白质合成起始区的序列 肽链的延长 肽链合成的终止及释放 肽键的形成 Tu\Ts循环 多多核糖体与核糖体循环 酶和辅酶 生物氧化 糖化学及糖代谢 脂化学及脂代谢、生物膜 核酸及核酸代谢 蛋白质及蛋白质代谢 物质代谢调节及激素的作用机制 酶活力计算题 10ml唾液，稀释20倍，取1ml测定淀粉酶活力，测知每5min水解淀粉产生2.5g还原糖,测定其稀释液中蛋白质含量为1mg/ml,计算唾液中淀粉酶的总活力，比活力，转换数(S-1 )。 酶活定义：在最适条件下每分钟水解淀粉生成1g葡萄糖的酶量称为1个活力单位。 葡萄糖分子量180,淀粉酶分子量50000。 酶促反应动力学 酶促反应动力学(kinetics of enzyme-catalyzed reactions)是研究酶促反应速度及其影响因素的科学。 这些因素主要包括酶的浓度、底物的浓度、pH、温度、抑制剂和激活剂等。 注意：速度指反应的初速度V0 ；研究某一因素对酶促反应速度的影响时，应该维持反应中其它因素不变。 1）. 米氏方程 酶的活性部位 与酶的活性直接相关的区域为酶的活性中心。是酶与底物结合并发挥其催化作用的部位。 结合酶的辅助因子是活性中心的重要组成部分。 活性中心的氨基酸残基在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链，通过折叠后而在空间结构上相互靠近。 酶活性的调节控制 一）别构调节 通过酶构象的改变来调节酶活性的作用称为变构调节。大部分别构酶的动力学曲线不符合米氏方程。 核酶：具有催化活性的RNA。非蛋白酶，识别特定RNA片段，进行内切，具有内切，连接，聚合等核酸酶功能。 如： 原生动物四膜虫26SRNA的内含子L19 RNA可自行催化（no protein）。 核酸酶：即核酸水解酶，化学本质为蛋白质，催化核酸的水解。 糖酵解 DNase I足迹试验 蛋白质结合在DNA片段上，能保护结合部位不被DNase破坏，DNA分子经酶切作用后遗留下该片段(亦称“足迹”)，进而可以确定它的序列。在电泳凝胶的放射性自显影图片上，相应于蛋白质结合的部位没有放射性标记条带。? DNase I足迹试验的实验流程如下：①待检双链DNA分子用32P作末端标记，通常只标记一端；②蛋白质与DNA混合，等两者结合后，加入适量的DNase I，消化DNA分子，控制酶的用量，使之达到每个DNA分子只发生一次磷酸二酯键断裂，并列设置未加蛋白质的对照；③从DNA上除去蛋白质，将变性的DNA加样在测序凝胶中作电泳和放射性自显影，与对照组相比后解读出足迹部位的核苷酸序列。 逆转录酶是一种多功能酶 以RNA为模板合成互补的DNA链，形成RNA－DNA的杂合分子。 具有Rnase H样的活力，水解RNA－DNA的杂合分子中的RNA。 以新合成的单链DNA为模板，合成互补链，形成双链DNA分子。 胰蛋白酶：碱性氨基酸 糜蛋白酶：芳香族氨基酸 （胰凝乳蛋白酶） 羧肽酶：羧基末端肽（小肽） 氨肽酶：氨基末端肽（小肽） AA的活化与搬运—氨基酰tRNA的合成 肽链合成的起始—起始复合物的形成 四个阶段 （70S-mRNA-fMet-tRNA） 肽链的延伸—包括进位,转肽,移位……. 肽键的终止—终止codon 激素由细胞分泌出来