《赢在微点》高考生物一轮复习课件：选修3专题1基因工程.pptVIP

4.目的基因的检测与鉴定 5．蛋白质工程与基因工程的关系 项目 蛋白质工程 基因工程 区 别 过程 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因) 目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 目的 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品 结果 可生产自然界没有的蛋白质 原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 联系 (1)蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程；(2)基因工程能为蛋白质工程提供理论及技术支持，蛋白质工程可对基因工程中所需的某些酶进行修饰、改造，使之更符合需要 【例2】　北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是(　　) A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白 C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 解析：过程①中通过逆转录法获得的目的基因，可用于基因工程，但该目的基因不存在内含子和非编码序列，因此不能用于比目鱼的基因组测序；将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因可能不再是抗冻基因；利用农杆菌的目的是将重组质粒导入受体细胞，而不是筛选重组质粒；应用DNA探针技术，可以检测受体细胞中是否成功导入了目的基因，但不能检测目的基因是否完全表达。 答案：B 对点微练3　科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题。 耐热的DNA聚合 四种脱氧核苷酸 SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 BamHⅠ和HindⅢ (3)图中⑤⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的__________、__________过程。 (4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________________________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是________________________________________ __________________________________。 脱分化 再分化 抗盐基因(或目的基因) 将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤 中，观察该烟草植株的生长状态 解析：理解转基因技术的步骤、成果是解题的关键。(1)PCR技术所需的原料是合成DNA的四种脱氧核苷酸。根据PCR反应原理，每次循环可分为在95℃时进行变性，在55℃时进行复性，在72℃时延伸，该过程需要耐热的DNA聚合酶。(2)从图中信息可知，SmaⅠ酶的切割位点位于目的基因和M抗生素抗性基因上。分析抗盐基因的DNA片段，可知该DNA含四种限制酶切点，其中SmaⅠ位于目的基因上，不宜采用。EcoRⅠ位于目的基因两侧，若用EcoRⅠ切割，则目的基因会自身环化。BamHⅠ与HindⅢ位于目的基因两端，且质粒中也有相应的合适的切割位点，因此用BamHⅠ和HindⅢ才能完整地切下该抗盐基因，同时保证目的基因与质粒连接方式的唯一性，防止自身环化。(3)转基因后的植物细胞，经脱分化产生愈伤组织，经再分化形成根、芽等，进而产生新的植株。 对点微练4　在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。如图为获得抗虫棉的技术流程。 请据图回答： (1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、___________________、将目的基因导入受体细胞、____________________________。 (2)A过程需要的酶有____________和_____________。 基因表达载体的构建 目的基因的检测与鉴定 限制酶 DNA连接酶 (3)要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用__________处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为______态；然后将______________________在缓冲液中混合培养完成转化过程。 (4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]_________和[E]__________。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入_________。 (5)