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1.限制性内切酶 3.2 体外受精和早期胚胎培养 根据资料回答下列问题: 1、资料上用到了什么生物技术? 试管婴儿技术 包括体外受精、胚胎体外培养和胚胎移植技术 2、试管婴儿和母亲正常怀孕的过程有何异同? 相同之处: 都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处: 体外受精,并在体外发育成早期胚胎,然后胚胎移植。 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 试管动物技术 待解决的问题: 国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右,引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元; 牛的生育率低,一头牛一胎只生一只,一生只能生育四五次。牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右;公牛产生的精子数目就更多了。 从试管牛说起 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。 体外受精 早期胚胎 试管牛(两头小牛) 试管动物技术过程: 请同学们分小组设计并绘制“试管牛”工厂化生产的技术流程图解。 胚胎移植 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 体外受精 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念:采取雌性动物的卵母细胞和雄性动物的精子,使其在试管中受精。 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 小型动物卵子采集:注射促性腺激素处理,使其超数排卵,然后从输卵管中冲取卵子 大型动物卵子采集:已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞,或借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 采集的卵子需要体外培养至MII中期 1、卵母细胞的采集和培养 牛卵巢 B超活采仪 超声波引导法: 借助超声波探头和屏幕的引导,从活母畜卵巢采集卵母细胞。 操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫,同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱 活体采集的牛卵母细胞 2、精子的收集和获能 1)收集精子方法有: 假阴道法 手握法 电刺激法 家畜采精用假畜台 2)获能处理: 培养法:把精子放入获能液中。 (啮齿动物、家兔和猪) 化学法:把精子放入一定浓度肝素或钙离子 载体A23187溶液中,用化学药物诱 导精子获能。(牛、羊) 卵巢 卵母细胞 新鲜或解冻的精液 卵母细胞培养 精子离心处理 MⅠ期卵母细胞 MⅡ期卵母细胞 精子获能处理 获能精子 体外受精 受精卵培养 获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下在在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程。 3、体外受精过程 ②使胚胎发育到适宜阶段进行受体移植或冷冻保存 受精卵 胚胎 受体 目的: 发育培养液: 移植: ? ? 不同生物有不同的适宜阶段 ①检查受精状况和受精卵发育能力 成分: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等. 胚胎的早期培养 胚胎移植 采集卵母细胞 体外培养 采集精子 体外获能 体外受精 早期胚胎培养 受体牛 (时期: ) 方法①②③ (方法,试剂) (试剂) (培养条件、目的阶段) 成熟的卵子 获能的精子 MII中期 方法①②③ 1、下列现代生物技术成果获得必须通过胚胎移植的是( ) A. 转基因良种鸡 B. 重组酵母乙肝疫苗 C. 单克隆抗体 D. 试管婴儿 D 2、采集的卵母细胞,在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精,以下原因不正确的是( ) A. 卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程 B. 动物排出的卵子成熟程度不同 C. 体外人工培养至减数分裂第二次分裂中期时才成熟 D. 冲出的卵子还需要培养一段时间由小变大 D 3、下列关于滋养层细胞的叙述,不正确的是( )A. 囊胚滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜 B. 可以用滋养层细胞做DNA分析性别鉴定 C. 囊胚滋养层细胞就是将
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