蛋白质质谱样品污染及预防综述.pptVIP

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
离心管专门放置,专供蛋白处理使用。不与其他实验混用,减少交叉污染。实验室空间洁净,减少灰尘污染。 生物质谱室 生命科学研究中心 1062室蛋白质组样品污染 污染来源 角蛋白:皮肤,毛发,衣服,灰尘 PEG:塑料试剂瓶,离心管,保鲜膜和PE塑料手套(PEG是塑料加工中的“润滑油”,国产离心管PEG残留可能较多) 表面活性剂:蛋白提取液,清洗玻璃试剂瓶的残留 (SDS,CHAPS,Triton,Tweens,ND-40) 影响范围 角蛋白:角蛋白质谱信号压制样品蛋白质谱信号,引起低丰度蛋白信号丢失。导致色谱柱污染和超载。 PEG和表面活性剂:抑制多肽电离,降低样品信号强度,驻留色谱柱,降低分离效率。 角蛋白和PEG:污染SDS胶和蛋白溶液 表面活性剂:污染蛋白溶液 蛋白质组样品污染的影响 角蛋白污染无法根除,可通过如下方法缓解 交叉污染:专用,分开储存的优质离心管 环境污染:洁净的实验室空间,减少灰尘和空气流动 接触污染:洁净的乳胶手套和实验服 表面活性剂和PEG:使用超滤管(10 kDa)去除 样品污染解决方法 样品污染问题 污染较少的SDS样品酶解后的TIC图 严重PEG污染的的SDS样品酶解后的TIC图 PEG污染信号 相对污染较少的SDS样品酶解后的质谱图 严重PEG污染的的SDS样品酶解后的质谱图 PEG污染信号 污染较少的SDS样品蛋白鉴定结果:目标蛋白得分远高于角蛋白污染 蛋白鉴定结果 角蛋白污染结果 严重角蛋白污染的SDS样品蛋白鉴定结果:角蛋白得分远高于目标蛋白 蛋白鉴定结果 角蛋白污染结果 BSA酶解液 进样量 fmol 得分 覆盖率% 1 2 4112 61 2 4 6098 71 3 6 8077 73 4 10 9946 81 5 10-2 12059 81 6 14 12663 81 7 20 17571 81 8 40 24250 87 9* 40 14375 88 2 fmol ,约0.1-0.2 ng 蛋白样品就能实现较可靠鉴定 不必一味追求大进样量 减小进样量也能控制和减少污染 液质联用在蛋白鉴定中的灵敏度 离心管专门放置,专供蛋白处理使用。不与其他实验混用,减少交叉污染。实验室空间洁净,减少灰尘污染。

文档评论(0)

4477769 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档