血红蛋白测定综述.pptVIP

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2017-01-11 发布于湖北
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血红蛋白测定综述.ppt

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血红蛋白测定苏州大学附属第二医院检验科郭敏王敏一.血红蛋白的分子结构和组成亚铁血红素（包括原卟啉，铁），珠蛋白二.血红蛋白测定（氰化高铁血红蛋白测定法----HiCN法). HiCN法检测原理：血红蛋白（SHb除外）中的亚铁离子（Fe2+）被高铁氰化钾氧化为高铁离子（Fe3+），血红蛋白转化成高铁血红蛋白（Hi）。Hi与氰化钾（KCN）中的氰离子反应生成HiCN。HiCN最大吸收波峰为540nm，波谷为504nm。在特定条件下，HiCN毫摩尔消光系数为44L/（mmol?cm）。HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比，根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度。方法学评价 HiCN法的质量控制 1.标本脂血标本、高WBC、高PLT2.器材定期校准3.采血部位 4.操作混匀 5.反应时间延长转化时间6.试剂质量7.标准曲线参考范围男：120~160 g/L；女：110~150 g/L ；新生儿：170~200 g/L。临床意义一.增高（同红细胞计数）二.降低：见于各种原因的贫血贫血的定义：血红蛋白低于参考范围。贫血程度的判断：轻度贫血：90~120（110） g/L 中度贫血：60~90 g/L 重度贫血：30~60 g/L 极度贫血：30 g/L 贫血程度判断时应注意：大量失血未补充液体时血红蛋白浓度变化不大，不能正确反映失血程度。失水时，使血红蛋白浓度升高，贫血亦不明显。实验步骤 1.测定参数测定方法：终点法比色杯直径 1cm 测定波长：540nm 试剂样本比 250:1 反应温度：室温反应时间 5min 2.在测定前去适量的工作试剂，在室温下平衡10min后使用. 实验步骤 3.具体操作见下表：管号空白管标准管测定管生理盐水（uL ） 10 0 0 标准液（uL ） 0 10 0 样本（uL ） 0 0 10 工作试剂（mL） 2.50 2.50 2.50 混匀，并在室温中放置5min. 4.用分光光度计在波长540nm处以空白管调零点，读取各管吸光度。计算方法测定管Au 血红蛋白（g/L）=——————— X 标准管血红蛋白浓度标准管As （g/L）