基因工程的定义..docVIP

基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。 2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤 3、DNA的定量和纯度测定 1. 紫外光谱法 琼脂糖凝胶电泳估计 原理： DNA的凝胶电泳的原理 相同分子量的DNA: 闭合环状卷曲超螺旋迁移最快， 线性分子次之， 伸展开环状最慢。 4. 限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 功能 即在核酸分子链的内部制造切口的酶。 自我保护作用。用来保护宿主不受外来DNA的感染，可降解外来的DNA，从而阻止其复制和整合到细胞中。 目前鉴定出三种不同类型的限制性内切酶。各自的特点 I 型限制性内切酶 II 类限制性内切酶 III类限制性内切酶 粘性末端（sticky ends，cohensive ends）含有几个核苷酸单链的末端。分两种类型：5’端凸出（如EcoR I切点）；’端凸出（如Pst I切点） 限制性内切酶识别的序列 1. 长度：一般为4-8个碱基，最常见的为6个碱基。 4个碱基:sau3AⅠ 5 个碱基:EcoRⅡ 6个碱基:EcoRⅠ 7个碱基