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谈苦参素对实验性肝纤维化的干预作用 摘要： 目的：观察苦参素对四氯化碳（CCl4）诱导的实验性肝纤维化的干预作用。方法：将SD大鼠分成正常对照组、模型组、苦参素小剂量治疗组（40 mg/kg）、中剂量治疗组（80 mg/kg）、大剂量治疗组（160 mg/kg），造模4周后苦参素治疗至实验第10周，取血测相关血清学指标，计算肝脏指数，测定肝组织匀浆中HYP和MDA含量。结果：苦参素能降低肝纤维化大鼠血清丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、胆汁酸（TBA）、γ－谷氨酰转移酶（GGT）和肝脏指数，同时能减少肝组织中羟脯氨酸（HYP）和MDA含量（P关键词： 肝纤维化；细胞外基质；大鼠；苦参素；四氯化碳 肝纤维化（liver fibrosis）是各种慢性肝病发展为肝硬化（1iver cirrhosis）的必经阶段。肝纤维化是由各种因素引起肝细胞损害和炎症，在修复过程中导致肝脏细胞外基质（extracellular matrix，ECM）异常增多和过度沉积的病理过程。苦参素又称氧化苦参碱，是由中药苦豆子和苦参根中提取的一种生物碱，一般认为其具有抗炎、抗病毒、调节免疫反应，抗肿瘤等生物学作用[1-2]。本研究观察苦参素对CCl4诱导的实验性肝纤维化的干预作用[3]，为进一步开发利用苦参素提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 实验动物 SD大鼠70只，体重140~160 g，雌雄兼用，由南通大学实验动物中心提供。动物许可证号：SCXK（苏）2002-0019。所有动物自由摄食，饮水。 1.2 药品与试剂 （1）四氯化碳（CCl4）：宜兴市第二化学试剂厂，批使用时用食用花生油配制成40%的油溶液；（2）苦参素：（主要成分为氧化苦参碱oxymatrine， OM）:江苏正大天晴药业股份有限公司，批号细结晶颗粒，按需用灭菌生理盐水配制呈溶液使用；（3）丙二醛（MDA）测定试剂盒，南京建成生物医学工程研究所，批号：XX0307；（4）羟脯氨酸（HYP）含量测定试剂盒，南京建成生物医学工程研究所，批号：XX0321。 1.3 实验方法 1.3.1 实验动物分组及模型制备[4] SD大鼠50只，随机分为5组：Ⅰ正常对照组、Ⅱ模型组、Ⅲ 苦参素小剂量治疗组（40 mg/kg）、Ⅳ苦参素中剂量治疗组（80 mg/kg）、Ⅴ苦参素大剂量治疗组（160 mg/kg），每组10只动物，雌雄各半。各造模组均采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型：用40%CCl4花生油溶液3.0 ml/kg皮下注射，每周2次，共10周；动物每周称重1次，并根据体重调整CCl4的剂量，正常对照组仅以花生油等容量皮下注射。苦参素治疗组从CCl4造模后第4周开始至第10周腹腔注射给药，每日1次，给药容量均为1.0 ml/kg。正常对照组、模型组腹腔注射等容量灭菌生理盐水，每日1次。 1.3.2 肝功能的检测 造模至第10周末，全部动物禁食16 h后，断头取血。血液40 ℃条件下2000 rpm离心15 min，吸取血清于4 ℃冷藏，24 h内用生化自动分析仪测定谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、胆汁酸（TBA）和γ－谷氨酰转移酶（GGT）。 1.3.3 肝脏指数的测算 造模至第10周末，全部动物称体重。取血后，将动物解剖，取出肝脏，滤纸拭干，置于电子天平上称重，以肝脏指数＝肝脏重量/体重×100，计算肝脏指数。同时剪取肝脏组织-20 ℃保存，备制作肝匀浆液之用。 1.3.4 肝组织中HYP和MDA含量的检测 取10％肝组织匀浆液测定每份肝匀浆中HYP和MDA与特定试剂反应后溶液的吸光值，并根据肝组织匀浆液中总蛋白的含量，分别计算肝脏中HYP和MDA的含量。 1.3.5 统计学方法 使用Stata6.0统计软件包进行数据处理。数据以■±s表示，用单因素方差分析和F检验处理数据，以P0.05）。 2.3 肝脏脏器指数及肝组织中HYP、MDA的检测 见表2。小剂量治疗组与模型组比较，肝脏指数虽有所减少，但差异无统计学意义（P0.05）；各治疗组间HYP和MDA含量差异亦无统计学意义（P0.05）。 3 讨 论 血清ALT、AST和TBA主要与肝细胞损伤、坏死程度呈正相关。我们实验结果显示，造模第10周末模型组动物的肝脏脏器指数、血清ALT、AST和TBA明显高于正常对照组（P[2] 周建明. 苦参素治疗慢性乙型病毒性肝炎78 例效果观察[J]. 南通医学院学报，XX，24（2）：201-203. [3] 闫 波， 陈飞虎， 吴繁荣， 等.鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠治疗作用及机制探讨[J]. 中国药理学通报，XX，24（12）:1640-1645. [4] Zim MC， Silveira TR， Schwartsmann G， e