（新）`第十三章 紫外可见分光光度法(定稿)精品.pptVIP

长江大学化工学院 第十三章 紫外可见分光光度法 一、光的基本性质 1、 2、 二、电磁波谱范围与分析方法的关系 1、近紫外光 200~400nm 紫外光度法 2、可见光 400~750nm 比色及可见光度法 三、吸收曲线 1、横坐标：代表波长（nm） 2、纵坐标：代表吸光度（A） 结论： a、 b、 c、 是一个定值，与浓度c无关 d、有色溶液的颜色正是它所选择吸收的互补色 四、朗伯—比耳定律 A：吸光度；I0：入射光的强度；I：透过光的强度；T：百分透光率 b：液层层度；c：摩尔浓度； k：摩尔吸收系数。 讨论： 五、偏离朗伯比尔定律的原因 1、非单色光引起的偏离 朗伯—比耳定律只对一定波长的单色光才能成立，入射光的波长范围越窄，即单色光越纯，偏离就越小。 五、偏离解值比尔定律的原因 2、溶液浓度过大，或对光产生反射、散射或引起光化学反应时，会偏离朗伯—比耳定律 3、溶质的解离、缔合、互变异构也会偏离朗伯—比耳定律 六、显色反应与测量条件的选择 1、显色反应 被测元素在某种试剂的作用下，转变成有色化合物的反应叫显色反应。 2、显色剂 完成显色反应所加入的试剂称为显色剂。 3、显色反应应满足的条件 a、定量进行，组成恒定 显色剂与被测物质的反应要定量进行，生成有色物质的组成要恒定，并且符合其化学式，才能通过测定有色生成物的吸光度来确定被测物质的浓度。 六、显色反应与测量条件的选择 b、选择性好 显色剂只与被测组分发生显色反应，而与其它共存组分不显色。 c、灵敏度高 k=104~105L·mol-1·cm-1 六、显色反应与测量条件的选择 4、影响显色反应的因素 a、显色剂的用量 以显色剂的用量为横坐标，以溶液的吸光度为纵坐标 六、显色反应与测量条件的选择 b、溶液的酸度 以pH为横坐标，A为纵坐标 六、显色反应与测量条件的选择 c、显色时间 以时间t 为横坐标，A为纵坐标 七、分光光度法测量条件的选择 1、入射光的波长 绘制A-λ曲线，找到λmax 2、吸光度范围 A=0.2~0.8 3、参比溶液 测定被测溶液的吸光度时，先用参比溶液调节仪器的透光率为100%（A=0），以除去由于吸收池溶液中的其它成分，溶剂和显色剂等对入射光的吸收和反射所带来的误差，其原因则是被测溶液的吸光度与参比溶液的吸光度之差是被测组分的真实吸光度。 八、分光光度计的构造 1、光源 a、钨灯：320～3200nm b、氢灯：150～400nm 2、单色器 将复合光分解成按波长顺序排列的单色光，用棱镜或光栅制成。 八、分光光度计的构造 3、吸收池 用光学玻璃或石英制成，为长方体结构，一个装参比溶液，一个装待测溶液，厚度为0.5，1，2，3，5cm共五种规格。 4、检测器 将光信号转变成电信号，获取T或A 九、常用分光光度计 1、721型 2、751-G型 十、分光光度测定的方法 1、用波长选择器测定同一有色 溶液在不同波长下 的 吸光度，绘制吸收曲线 2、在最大吸收波长下，测定不同浓度的有色溶液的吸光度，绘制标准曲线 3、在最大吸收波长下，测定未知浓度的有色溶液的吸光度，然后与标准曲线进行比对，最后确定未知液的浓度 十一、紫外——可见分光光度法的应用 1、单组分含量的测定 a、邻二氮菲法测定微量铁 磺基水杨酸法测定微量铁 Fe3++3SSal→[Fe(SSal)3]3- +6H+ 十一、紫外——可见分光光度法的应用 b、磷的测定 ①H3PO4＋12(NH4)2MoO4＋21HNO3＝ (NH4)3PO4·12MoO3＋12NH4NO3＋12H2O ②用微生物C将Mo(Ⅵ)还原为Mo(Ⅴ)，即生成蓝色的磷钼蓝 2、双组分含量的测定 a、吸收峰互不重叠 用单组分法测定 十一、紫外——可见分光光度法的应用 b、吸收峰相互重叠 例如：废水中的Mn和Cr含量的测定 十一、紫外——可见分光光度法的应用 MnO4-： λmax=545nm Cr2O72-： λmax=440nm 在440nm处， 在545nm处， 十一、紫外——可见分光光度法的应用 * A 0 C 标准曲线 讨论:当有色溶液不变时，用同一比色皿做实验，吸光度与浓度成正比。 d、显色温度 七、分光光度法测量条件的选择 a、溶剂（蒸馏水）参比 当被测溶液组成较为简单，干扰组分很少或在测定波长下几乎没有吸收时，可用溶剂（如蒸馏水）作参比溶液，以主要消除吸收池和溶剂