高原鼢鼠肉木瓜蛋白酶酶解物对小鼠免疫功能的影响.docVIP

高原鼢鼠肉木瓜蛋白酶酶解物对小鼠免疫功能的影响作者：潘明， 赵弋清，侯若彤，刘素君，杨志荣 【摘要】 目的研究高原鼢鼠肉蛋白的木瓜蛋白酶酶解物生理活性功能，对酶解物进行了免疫活性实验。方法通过MTT法和中性红比色法测定其对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、网状内皮系统吞噬功能、NK细胞杀伤毒性，鼠抗体生成脾细胞数(IgM的影响。结果酶解物高、中剂量与对照相比有显著差异，而其中以高剂量组的活性最明显，能够显著提高小鼠淋巴细胞的增殖能力；激活小鼠网状内皮系统，增强吞噬功能；增强NK细胞活性；增加小鼠脾脏的抗体生成细胞数。结论 高原鼢鼠肉蛋白的木瓜蛋白酶酶解物能明显提高正常小鼠细胞免疫、体液免疫及NK细胞杀伤毒性的能力。 【关键词】 高原鼢鼠肉；木瓜蛋白酶； 酶解；免疫功能 Abstract：Objective In order to investigate the physiological funtions of papain digest of Myospalaxbaileyi flesh protein, immune activity experiment was done with the digest. MethodsMTT method and neutral red colorimetric method were applied to measure the effect of the digest on the proliferation of spleen lymphocyte of mice, the phagocytic function of celiac macrophage and reticuloendothelial system, the killing toxicity of NK cells, and the number of splenocyte induced by rat antibody (IgMPFC). ResultsThe groups with high and middle dosage have significant difference from the control group, with the high dosage group showing the most obvious activity. ConclusionThe papain digest of Myospalaxbaileyi flesh protein has a significant promotion effect on the cell and humoral immunity of normal rat as well as the killing and toxicity activity of NK cells. Key words：Myospalax baileyi meat； Papain； Hydrolysis； Immune function 高原鼢鼠Myospalax baileyi是栖息于青藏高原的一种危害草场和农田的数量巨大的地下啮齿动物。据营养成分的分析结果（《四川动物》待发），高原鼢鼠肌肉除含有亚油酸等对人体有益的不饱和脂肪酸外，还有丰富的蛋白质,钙、镁、铁、锌、磷等无机盐和烟酸、核黄素、视黄醇等维生素，是一种营养价值很高的蛋白质资源。近年的研究表明，蛋白质水解为小肽后就可以被人体吸收［1］，而蛋白质水解产物具有蛋白质无法比拟的生理功能和营养价值。近几年对高原鼢鼠肉的研究集中在脂溶性成分抗缺氧机制上［2～5］，目前尚未见对高原鼢鼠肌肉蛋白酶解液免疫功能的相关研究报道。 为了综合开发利用高原鼢鼠资源，变害为宝，提高高原鼢鼠肉蛋白的营养和利用价值，本研究采用酶法水解高原鼢鼠肉，对酶解液的氨基酸成分进行了分析，并针对免疫系统中T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞，进行了T淋巴细胞转化实验、小鼠抗体生成脾细胞数(IgM-PFC)、NK细胞杀伤毒性实验等免疫学实验，探讨高原鼢鼠肉酶解液对小鼠免疫功能的影响。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 1.1.1 材料 高原鼢鼠Myospalax baileyi：捕于四川省阿坝州若尔盖县。 1.1.2 试剂 木瓜蛋白酶5.8×105 U/g，美国Sigma公司产品；RIMP1640培养基，美国GIBCO公司产品；MTT，ConA，LPS；Alsever溶液；Hank‘s溶液；0.8%戊二醛溶液；1.51%绵羊红细胞悬液。其它试剂：市售，均为分析纯。 1.1.3 动物 昆明种健康成年小鼠，雌雄各半，体重20～22 g，由四川大学华西实验动物中心提供。 1.2 仪器