缺镁金盏菊幼苗生理生化指标影响的研究.docVIP

缺镁对金盏菊幼苗生理生化指标影响的研究 摘要：本实验通过对金盏菊幼苗进行缺镁元素培养，观察其在完全培养液浇灌下生长状况和缺镁培养表现得症状，及测定植物细胞膜透性、超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性和生长指标的测定，以此研究镁元素对金盏菊生长的影响。实验结果表明在镁缺营养液培养下金盏菊片的细胞质膜相对透性减弱，丙二醛（MDA）含量显著增加，产生的活性氧物质诱导超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性活性下降。 关键词：金盏菊幼苗、缺镁元素培养、缺素症状、指标测定 金盏菊又名金盏花，为菊科金盏菊属植物。　金盏菊株高30～60cm，为二年生草本植物，全株被白色茸毛。单叶互生，椭圆形或椭圆状倒卵形，全缘，基生叶有柄，上部叶基抱茎。头状花序单生茎顶，形大，4-6cm，舌状花一轮，或多轮平展，金黄或桔黄色，筒状花，黄色或褐色。也有重瓣（实为舌状花多层）、卷瓣和绿心、深紫色花心等栽培品种。常用于花坛摆花。现利用土培法，对金盏菊幼苗进行缺镁培养，来探究金盏菊的各种生理指标的变化的情况以及生长情况，为金盏菊的栽培管理提供科学依据。 1 材料与方法 1.1实验材料及器材：金盏菊幼苗、沙子、TBA 、TCA、石英砂、丙酮、磷酸钾缓冲液、完全培养液、电导仪、温箱、烧杯、量筒、分光光度计、离心机、电子天平、研钵、移液管、恒温水浴锅、容量瓶、冰箱等。 1.2实验方法：在两个砂基中培养等量的金盏菊幼苗，分别标上号1、2，在相同的环境下进行一定时间的培养之后，对其进行缺素培养。1号砂基浇灌完全营养液作为对照组，2号砂基浇灌缺镁元素的营养液。每隔两天浇一次营养液，连续培养两周。缺素培养两周后取两次样对其细胞质膜透性检测丙二醛（MDA）含量测定、过氧化物酶（POD）活性的测定、超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定、各生理指标进行测定。并测定植株株高、叶长、叶宽。 1.3植物生理指标的测量： ①植物细胞质膜透性的检测。取实验组和对照组的金盏菊叶片，洗净擦干，分别量取0.3g；剪碎、研磨、过滤，将三种滤液等量的装入小试管中，增加一个等量蒸馏水的空白对照管，先测常温下的电导率值，再沸水加热10 min后测量电导率值。 ②金盏菊的丙二醛含量的测定。取0.3g的金盏菊叶片，剪碎，加入10%三氯乙酸（TCA）2 ml和少量石英沙研磨，再加8 ml TCA湮没后，将浆液以4000r/min离心10min，取上清夜即样品提取液；吸取2 ml提取液到一试管，对照管加2 ml蒸馏水，各加入2 ml0.6%TBA液，混匀，沸水浴15 min，冷却，以4000r/min离心15min，取上清夜测定532nm和450nm的OD值。 ③过氧化物酶（POD）活性的测定。取1.0g金盏菊叶片，加入预冷的5ml20mmol/L KH2PO4,研磨取匀浆，以4000r/min离心15min，取上清夜并低温保存；取四只分光光度计比色杯（光径1cm）,再其中一只加入3ml反应混合液和1mlKH2PO4作为对照，另外3只分别加入3ml反应混合液和1ml上述酶液,马上记时，测定470nm处的OD值，每隔1min读数一次。 ④超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定。 取5支试管,分别编号(3支测定管,2支对照管)，按照表2的顺序加入试剂(3支测定管加酶液, 2支对照管加缓冲液），混匀后将1支对照管置暗处，其他各管于4000lx日光下反应15min（要求各管受光情况一致，温度高，时间缩短，低时延长）；反应结束后，以不照光的对照管作空白进行调零，分别测定其他各管的OD560nm吸光度。并记录好照光对照管的吸光度（ODC）和3支测定管的吸光度（ODS）。 表1测定SOD活性时各试剂加入量 试剂（酶） 用量/ml 终浓度（比色时） 50mmol/L磷酸缓冲液（pH7.2） 1.7 130mmol/L MET溶液 0.3 13mmol/L 750umol/L NBT溶液 0.3 75umol/L 100umol/L Na2-EDTA溶液 0.3 10umol/L 20umol/L 核黄素溶液 0.3 2.0umol/L 酶液 0.1 对照2支管以缓冲液代替 总体积 3.0 2实验结果与分析 2.1金盏菊的生长情况 2.1.1实验结果 表2 营养液 生长指标 完全营养液 缺镁营养液 株高 13cm 9cm 叶长 9cm 7cm 叶宽 2.5cm 2cm 2.1.2实验分析 从金盏菊的株高、叶长、叶高可以明显看出，缺镁元素对其的生长起抑制作用。 2.2金盏菊细胞质膜透性检测 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起重要的作用。细胞膜透性变得愈大，表示受害愈重，抵抗性愈弱，反之则抵抗性愈强。 2.2.1实验结果：相对电导率=（浸泡液电导率值-空白电导率值）