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第十一章 生物净化 本章将讨论以下内容: 环境污染的来源及状况; 生物对污染净化原理与应用; 富营养化是指水体中因氮、磷等元素含量过高而引起水体表层的蓝细菌和藻类过度生长繁殖的现象。 水华:发生在淡水水体中的富营养化。 赤潮:发生在河口、港湾或浅海等咸水区水 体的富营养化现象。 1、微生物的净化作用: 例:微生物对水体的净化 活性污泥一般经过人工培养驯化而获得,并在污水处理过程中,能被不断地返回接种使用。活性污泥是一种绒絮状小颗粒,主要由菌胶团形成菌、原生动物及悬浮物组成。 活性污泥微生物: 细菌:微生物主要组成部分,以异养性原核细菌为主,1ml正常污泥中含细菌107-108个,细菌种属与污水中有机成分有关,是有机污染物的分解者,在环境条件适宜时其世代时间仅为20-30min。 真菌:种类繁多,活性污泥中较多出现的为腐生或寄生的丝状菌,异常增殖会引发污泥膨胀。 原生动物:为活性污泥系统中的指示性生物,是首次捕食者。 后生动物:仅在完全氧化型活性污泥系统中出现,是水质非常稳定的标志,是生态系的二次捕食者。 重要的工作参数 微生物种类和数量 混合悬浮固体:1L曝气池混合液中所含悬浮固体的干重。间接反映废水中微生物浓度。 混合液挥发性悬浮固体:去除混合液中无机物的重量,更接近活性污泥中微生物的重量。 污泥沉降比:一定量的曝气池混合液,静置30min后,沉降污泥体积与原混合液体积之比。反映曝气池正常运行时的污泥量,大小也能反映出污泥膨胀等异常现象。 污泥容积指数:曝气池中混合液经30min静置后的体积与污泥干重之比。反映污泥的凝聚性和沉降性。 污泥负荷:在单位时间内,单位重量的活性污泥能处理的有机物数量。 活性污泥法对废水的要求及运行 pH在6-9之间,不能波动太大。 进水中有机物浓度的控制:进水BOD 500-1000mg/ L。 水中养料要具有微生物生长所必需的基本化合物和元素。BOD:N:P=100:5:1。 水中有毒物的控制 溶解氧:2-4mg/ L. 基因工程的方法构建甲基对硫磷 MP 和呋喃丹分解菌株 发展一种能将外源目的基因整合到受体菌的染色体上且不带入抗性的整合系统 甲基对硫磷水解酶基因 mpd,虽然不能完全矿化 MP,但水解生成的 PNP 的毒性比 MP 低 100~120 倍 策略:甲基对硫磷水解酶基因 mpd整合到Sphingomonas sp.CDS-1菌株中染色体中,且不带抗性。 重组载体的特点 1.同源重组的方式 2.复制起始位点为 oriR ,只有在宿主菌提供 λ蛋白 基因编码 的情况下才能正常复制 。 3.含有两个拷贝的 sacB 基因 ,该基因编码的果糖蔗糖酶 ,能将蔗糖水解为果糖并生成大分子量的果聚糖 ,在 G- 细菌周质空间累积 ,导致细胞停止生长或死亡 ,因此 ,含有该基因的 G- 宿主菌对蔗糖高度敏感 ,可以用来作为同源重组双交换的正筛选标记 4、含有 oriT 位点 ,可以在宿主 E. coliSM10 染色体上tra 基因的作用下直接进行二亲结合转移 5、含有Amp 和 Km两种抗性 ,便于同源重组单交换子的筛选 阳性克隆的筛选 在 Str、Km 和 Amp 三抗平板上长出来的能水解MP产生黄色水解圈的即为重组交换子。 涂布于添加 Str 和MP的 SLB 平板上 ,挑取能产生黄色水解圈的单菌落即为阳性同源重组双交换子 细胞工程技术 原生质体融合技术降解纤维素 二、绿色植物的净化作用: 制备特定功能的转基因植物 2.植物可以净化土壤中的重金属污染物 上例是传统的净化水体的方法,如果碰到难以降解的有机物,怎么办? 基因工程,细胞工程、发酵工程 1、甲基对硫磷 MP 和呋喃丹为两种剧毒农药,很难降解 2、质粒的不稳定性,且多含有抗性带来的环境释放潜在风险 能够高效、快速降解呋喃丹的鞘氨醇单胞菌完全矿化呋喃丹 一、好氧堆肥 发酵工程的应用 -固体垃圾的堆肥处理技术 通气条件下借好氧性微生物活动使有机物降解,从而使固体废弃物无害化、资源化。 特点:高温堆肥(一般在50-60℃,极限可达80-90℃) 堆制 升温 高温 降温 腐熟 1-2d 50-60℃ 中温菌 嗜热菌 中温菌 寄生虫和病原菌被杀死 30-40 ℃ 一次发酵 二次发酵 发热阶段 堆温升到50度左右称为发热阶段。主要是无芽孢杆菌、放线菌、真菌等中温性微生物活动,分解有机物,同时释放氨、二氧化碳和热量。 高温阶段 堆温升到65度,称为高温阶段。主要有好热放线菌、高温纤维分解菌,主要分解纤维素、半纤维素和部分木质素,并进行腐殖化过程。 降温阶段 堆温降到50度以下,称为降温阶段。此时,堆内的微生物种类和数量都比前一阶段多,中
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