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专题二细胞工程(复习)
几个概念: 愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 (三)植物细胞工程的实际应用 1、植物繁殖的新途径 * 细胞工程 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 异种植物细胞 杂种细胞 转基因植物 异种动物细胞 动物细胞群 重组细胞 体细胞细胞核 早期胚胎 受精卵 去核卵细胞 克隆动物 试管婴儿 动物细胞融合 植物体细胞杂交 植物组织培养 动物细胞培养 核移植 胚胎移植 体外受精 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 (一) 细胞的全能性 1、定义: 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2、原理: 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因,从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、差异: (1) 受精卵的全能性最高 (2) 受精卵分化后的细胞中,体细胞的全能性比生殖细胞的低。 植物细胞的全能性 受精卵 生殖细胞 体细胞 > > 4、大小 5.细胞表现出全能性的条件 离体状态 有一定营养物质、激素和其他外界条件 思考讨论:为什么体内细胞没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织、器官? 基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期,生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的,合成的蛋白质也不一样,从而形成了不同的组织和器官。 过程 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 外植体 脱分化 植物激素: 细胞分裂素、生长素 再分化 1.植物组织培养 植物组织培养条件: 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 植物细胞的脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。 植物细胞的再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 2、植物体细胞杂交的过程 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法? 促进融合的方法? 融合完成的 标志 植物细胞B 1)微型繁殖 2)作物脱毒 3)神奇的人工种子 2、作物新品种的培育 1)单倍体育种 2)突变体的利用 3、细胞产物的工厂化生产 比较 植物组织培养 植物体细胞杂交技术 所属范畴 原理 步骤 意义 联系 无性繁殖 细胞全能性 ①脱分化 ②再分化 保持优良性状 繁殖速度快、大规模生产 提高经济效益 杂交技术应用了组织培养 克服不同种生物远缘杂交不亲和的障碍 ①去除细胞壁 ②融合形成杂种细胞 ③组织培养 膜流动性 细胞全能性 染色体变异 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程常用技术 一、动物细胞培养 从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 ,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞 。 1概念: 动物胚胎或 幼龄动物的组织、器官 如:肾、肺等 细胞生命力旺盛,分裂能力强 原理:细胞增殖 使细胞和培养液充分接触 组织 单个细胞 生长和增殖 2、过程: 取什么样的组织? 如何将组织分散成单个细胞? 如何制备细胞悬液? 什么叫原代培养? 什么叫传代细胞培养? 如何进行传代培养? 什么是细胞贴壁现象? 什么是细胞接触抑制 取幼龄组织或器官 如:肾脏 肌肉 用胰蛋白酶处理 加入细胞培养液 细胞贴壁:培养过程中,细胞贴附在瓶壁上的现象。 要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒 细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞。 1
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