新·9.5 紫外吸收光谱的应用.pptVIP

第九章 紫外-可见吸收光谱法 9.5.1 紫外-可见吸收光谱图中提供的信息 9.5.2 在有机物结构分析中的应用 9.5.3 定量分析方法 9.5.4 导数分光光度法 9.5.1 紫外-可见吸收光谱图中提供的化合物结构信息 可获得的结构信息： 二、光谱解析注意事项 9.5.2 在有机化合物结构分析中的应用 一般过程： 二、不饱和度计算 三、化合物结构确定示例 （3）计算验证λmax = 231 nm 例2． 9.5.3 定量分析 1、单组分的测定 a.标准曲线法 b.标准加入法 第三种情况:两吸收曲线互相重叠，但服从 朗伯-比尔定律 选择波长组合λ1、 λ2的基本要求是： 其中，测量波长λ2和惨比波长λ1的选择与组合是关键。 以两组分x和y的双波长测定为例： 设：x为待测组分，y为干扰组分，二者的吸光度差分别为： △Ax和△Ay，则该体系的总吸光度差△Ax+y为： △Ax+y = △Ax + △Ay 如何选择波长λ1、 λ2有一定的要求。 例. 输铁蛋白是血液中发现的输送铁的蛋白，它的相对分子质量为81000，并携带两个Fe（Ⅲ）离子。脱铁草氨酸是铁的有效螯合剂，常用于治疗铁过量的病人,它的相对分子质量为650，并能螯合一个Fe（Ⅲ）。脱铁草氨酸能从人体许多部位摄取铁，通过肾脏与铁一起排出提外。被铁饱和的输铁蛋白（T）和脱铁草氨酸（D）在波长λmax 428nm和470 nm处的摩尔吸光系数分别为： 铁不存在时，两个化合物为无色。含有T和D的试液在 波长470 nm处，用1.00cm吸收池测得的吸光度为0.424.在波长428nm处测得吸光度为0.401，试计算被铁饱和的输铁蛋白（T）和脱铁草氨酸（D）中铁各占多少分数？ 解：由吸光度的加和性，得 在λmax 470nm处 0.424 = 4170×1.00×c T + 2290×1.00×c D 在λmax 428nm处 0.401 = 3540×1.00×c T + 2730×1.00×c D 有以上两式解得T和D的浓度 c T = 7.30×10-5 mol·L-1 c D = 5.22×10-5 mol·L-1 在输铁蛋白中铁的质量分数为： 在脱铁草氨酸（D）中铁的质量分数为： 9.5.4 导数分光光度法 导数分光光度法 导数分光光度法 导数分光光度法 内容选择 * * 第五节 紫外吸收光谱的应用 UV-VIS spectrophotometry,UV Applications of UV-VIS ?一、 可获得的结构信息 （1）200～800 nm 无吸收峰 饱和化合物，单烯。 （2）270～350 nm有吸收峰(κ=10～100 L·mol-1·cm-1) 醛酮 n→π* 跃迁产生的R吸收带。 （3）250～300 nm有中等强度的吸收峰(κ=200～2000 L·mol-1·cm-1) 芳环的特征 吸收(具有精细解构的B吸收带)。 （4）200～250 nm有强吸收峰(κ≥104 L·mol-1·cm-1)： 表明含有一个共轭体系(K)带。 共轭二烯：K带(?230 nm)。 ???-不饱和醛酮：K带?230 nm ，R带310 ? 330nm。 260nm，300 nm，330 nm有强吸收峰：3,4,5个双键的共轭体系。 (1) 确认?max，κ，初步估计属于何种吸收带； (2) 观察主要吸收带的范围，判断属于何种共轭体系； (3) 乙酰化位移 C H 3 C H 3 O H C H 3 O C O C H 3 B带： 262 nm(κ302 L·mol-1·cm-1) ，274 nm(κ2040 L·mol-1·cm-1) ， 261 nm(κ300 L·mol-1·cm-1)。 (4) pH的影响 加NaOH红移→酚类化合物，烯醇。 加HCl蓝移→苯胺类化合物。 一、谱图解析方法 三要素：谱峰位置、强度、形状。 谱峰形状：定性指标；谱峰强度：定量指标； 紫外可见光谱特征参数：λmax和κmax，K，B，R带。 1.了解尽可能多的结构信息，分子式 ，性质等。 2.计算出该化合物的不饱和度。 3.确认最大吸收波长λmax，计算κmax。 4.根据λmax和κmax可初步估计属于何种吸收带，属于何种共轭体系。 κmax在(1～20)?104 L·mol-1·cm-1 ，通常是α,β-不饱和醛酮或共轭二烯骨架结构。 κmax在1000 ～ 104 L·mol-