食品生物技术导论复习提纲食品物技术导论复习提纲.docVIP

第二、四、八章 一、名词解释 1、食品生物技术：食品生物技术指生物技术在食品工业中的应用，其以基因工程技术为核心手段，包括细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程等技术，贯穿于食品制造的全过程（上游过程和下游过程）。或者，利用生物体及其细胞、亚细胞和分子组成部分，结合工程学、信息学等手段研究及加工处理或制造食品产品的新技术。 2、基因工程：指用酶学方法将异源基因与载体DNA进行体外重组，将形成的重组DNA导入宿体细胞，使异源基因在宿体细胞中复制表达，从而达到改造生物品种或性状，大量生产出人类所需的生物品种和产物，也称分子克隆或重组DNA技术。 3、目的基因：指已被或欲被分离、改造、扩增和表达的特定基因或DNA片段，能编码某一产物或某一性状，又称特异基因或靶基因。 4、基因重组：指将目的基因（或外源基因）与载体在体外结合构建形成重组子。 5、感受态：指宿主细胞能吸收外源DNA分子而有效作为转化受体的某些生理状态。 6、限制性内切酶：指一类以环形或线形双链DNA为底物，能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并在合适的反应条件下使每条链一定位点上的磷酸二酯键断开，产生具有3’-OH和5’-P基团的DNA片段的内切脱氧核糖核酸酶。 7、酶的固定化：是指将酶与不溶性载体结合，使游离酶、细胞或细胞器等的催化活动完全或基本上限制在一定空间内的过程。 8、酶分子修饰：通过改变酶分子的结构，使酶的某些特性和功能发生改变的技术。 9、转基因食品：是指用转基因生物制造、生产的食品、食品原料及食品添加物等。 10、受体（宿主）细胞：指在转化、转导和杂交中接受外源基因DNA导入的细胞，是重组体扩增的场所。 二、思考题 1、碱性SDS法提取质粒的原理。 在pH12.0~12.5范围内使染色体中双螺旋开链DNA选择性变性，而闭环双链DNA不变性。经乙酸钠中和后，SDS引起蛋白质-SDS复合物和相对分子质量高的DNA沉淀，再经高速离心将质粒DNA留于上清液中而分离。 2、限制性内切酶的作用机制。 限制性内切酶以环状或线性的双链DNA为底物，在一定条件下，识别一定的核苷酸序列，在两条链的特定的磷酸二酯键上催化切开，产生具有3’-OH和5’-P基团的DNA片段。 3、酶分子修饰的主要方法有哪些？ （1）化学修饰：利用化学手段将某些化学物质或基团结合到酶分子上，或将酶分子的某些部分删除或置换，改变酶的理化性质，最终达到改变酶催化性质的目的。 ①大分子结合修饰； ②肽链有限水解修饰；③侧链基团修饰； ④分子内或分子间交联：使用双功能试剂交联，更稳定； ⑤氨基酸置换修饰：改变活力中心的氨基酸； ⑥金属离子置换修饰：如将酰基化氨基酸水解酶的活力中心的Zn2+置换为Co2+。 （2）物理修饰：通过物理方法，不改变酶的组成单位及基团，只使酶分子的空间构象发生改变（副键变化或重排），而改变酶的某些特性和功能。 ①高压处理：酶活提高；最适条件改变；②适当变性改变空间构象：稳定性适当提高 4、提高微生物产酶的措施主要有哪些？ （1）选育优良细胞（基因重组技术） （2）强化生产过程： ①控制合理发酵条件：pH、温度、基质浓度等；②添加诱导物：如乳糖诱导β-半乳糖苷酶；③控制阻遏物浓度：产物积累一定浓度，合成受阻；④添加表面活性剂：主要是非离子型表面活性剂；⑤添加产酶促进剂： 植酸钙镁、聚乙烯等⑥⑦⑧⑨⑩ 5、固定化处理后酶的性质会发生哪些改变？ （1）固定化酶的活力：与其溶液酶相比，大多数固定化酶活性下降。 （2）固定化酶的稳定性：大多数酶在固定化后都不同程度地提高了稳定性，延长了有效寿命。 ①热稳定性：大多数酶固定化后与溶液酶相比，有较高的热稳定性，反应的温度一般较溶液酶的高 ②pH一酶活力关系：反应的最适pH和酶活力-pH曲线的变动依据酶蛋白和载体的电荷而定。 带负电荷的载体，往往导致固定化酶的最适pH向碱性方向移动；带正电荷的载体则相反。 ③对蛋白酶的抵抗力提高：溶液酶经固定化后提高了对蛋白酶的抵抗能力。 ④对变性剂、抑制剂的抵抗能力提高：酶经固定化后，提高了对蛋白质变性剂和抑制剂的抵抗能力。 ⑤操作稳定性：固定化酶在操作中可以长期使用。 ⑥贮藏稳定性：大多数酶经固定化后提高了贮藏的稳定性。 6、基因工程的主要内容包含哪些内容？ （1）从生物有机体基因组中，分离出带有目的基因的DNA片段。 （2）将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制的并具有选择记号的载体分子上，形成重组DNA分子。 （3）将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（亦称寄主细胞）并与之一起增殖。 （4）从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞，并筛选出已经得到扩增的目的基因。 （5）将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。 7、基