沙门氏菌的检验分解.ppt

* * * * * * * * 1） 采纳API 20E?或Vitek GNI?为传统生化鉴定方法的选择性替代方法”。 2） 生化鉴定项目进行调整 原国标中生化鉴定是将可疑菌落同时接种于三糖铁（TSI）琼脂、蛋白胨水 (供做靛基质试验)、尿素琼脂 (pH7.2)、氰化钾 (KCN) 培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基； 现修改为：在接种TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时增加一项营养琼脂（NA），经TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的选择后，可筛掉大部分非沙门氏菌株，大大减少了工作量，同时也满足了API 20E?或Vitek GNI?鉴定的需要。 2） 生化鉴定项目进行调整（续） 为保持与原标准的一致性，本标准也保留了可以同时直接接种蛋白胨水 (供做靛基质试验)、尿素琼脂 (pH7.2)、KCN 培养基的内容。本部分还增加了对疑似菌落进行留样确认的部分，以备必要时复查，这对生化鉴定不确定的菌落进行进一步验证是非常必要的。 第1位数 第2位数 第3位数 第4位数 第5位数 第6位数 第7位数 结果判定 ON P G ADH L DC ODC C I T H2S URE T D A IND VP GEL GLU MAN INO S O R RGA SAC ME L AMY ARA OX 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 反应结果 - + + + + + - - - - - + + + + + - + - + - 沙门菌 应得树枝 0 2 4 1 2 4 0 0 0 0 0 4 1 2 4 1 0 4 0 2 0 组合编码 6 7 0 4 7 5 2 沙门氏菌20E鉴定结果 布氏柠檬酸杆菌20E鉴定结果 河生肠杆菌20E鉴定结果 应用一系列小的多孔的聚苯乙烯卡片进行测试，卡片含有干燥的抗菌药物和生化基质。先制备一定浓度的欲鉴定菌株的菌悬液，然后将菌悬液接种到各种细菌的小卡上，将其放入具有读数功能的孵箱内，每隔一定时间，仪器会自动检测培养基的发酵情况，并换算成能被计算机所接受的生物编码。最后由计算机判定，打印出鉴定结果。 1 血清学鉴定中的菌体分群为选择性试验项目 原国标进行O抗原、H抗原鉴定及菌体分群； FDA、AOAC进行O抗原、H抗原鉴定，菌体分群为选择性； ISO进行O抗原、H抗原鉴定。 综合以上生化试验和血清学鉴定的结果,报告25g样品中检出或未检出沙门氏菌。 选择性增菌液的配置 分离培养基的质控 疑似菌落的挑选 API 20E 结果判读 血清质量 VIDAS（生物梅里埃公司） BAX （杜邦公司） VIDAS 应用酶联免疫技术制造的全自动免疫分析仪 ，用荧光分析技术通过固相吸附器，用已知抗体来捕捉目标生物体，然后以带荧光的酶联抗体再次结合，经充分冲洗，通过激发光源检测，即能自动读出发光的阳性标本，其优点是检测灵敏度高，速度快，可以在48小时的时间内快速鉴定沙门氏菌、大肠杆菌O157：H7、单核李斯特菌，空肠弯曲杆菌和葡萄球菌肠毒素等。 DUPONT Qualicon BAX System 应用DNA分子核酸探针或基因探针技术制造的全自动PCR分析仪。将已知核苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法标记，加入已变性的被检DNA样品中，在一定条件下即可与该样品中有同源序列的DNA区段形成杂交双链，从而达到鉴定样品中DNA的目的。 * * * * * * * * * * * 全国食品卫生标准委员会 微生物标准协作组 2008年11月14日-18日 食品卫生微生物学检验（GB/T4789.4） 修订背景 国内外方法 修订内容 前增菌 选择性增菌 分离平板 生化鉴定 血清学鉴定 报告 回顾一下食品卫生微生物学检验标准的制定，经历了从无到有，从事该领域的工作者，花费了巨大的心血，先后制修订了84版、9