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含菌量測定法
计数器计数法
纽鲍尔(Neubauer)血球计数板计数操作方法如下:
(1)取清洁的血球计数板,将清洁的专用盖玻片放在血球计数板上有刻度的位置。
(2)将芽孢率达80%的发酵原液加入转子用磁力搅拌器振荡45min,从中取出10ml至装有90ml无菌水的250ml三角瓶中,加转子在磁力搅拌器上振荡30min,再从中取出5ml至装有45ml无菌水的100ml三角瓶中,加转子在磁力搅拌器上振荡20min,再从中取出1ml至装有9ml无菌水的试管中,在漩涡振荡器上振荡2min。依次将培养的菌液用无菌水进行适当的稀释,以每小格有3-5个细菌为宜。
(3)摇匀稀释的菌液,用无菌滴管吸取少量菌液,从盖片的边缘滴一小滴(不宜过多),使菌液自行进入平台的计数室。加菌液时注意不得使计数室内有气泡,静置约5 min。在低倍镜下找到方格网后,转换高倍镜进行观察和计数;观察80个小格,以它的平均数乘以4000000,就是每毫升菌悬液中芽孢的数量。
(4)计数(16×25规格的计数板)
细胞个数(个/ml)=80个小格内细菌数×菌液稀释倍数×4×106/80
任务
微生物农药检测
①承担农业部或各省技术监督部门指定的微生物产品质量监督抽查检验,优质产品的评选和复查检验。
②受有关部门委托,对申请办理微生物农药登记的产品质量进行检验及对新产品、新品种、科研成果进行鉴定检验。
③承担各部门的委托检验和仲裁检验。
④进行微生物农药质量的研究,对外承担微生物农药产品的质检服务,承担和参与相关国家标准、行业标准及企业标准的制定及试验性工作。
⑤对微生物农药产品中杂质及在农作物上施用后产生药害的物质进行鉴定和检测。
⑥对地方和企业农药质量检验机构进行技术指导、技术服务和人员培训,解决有关微生物农药质量检验的问题。
食(药)用菌检测
①承担农业部门或其他相关部门指定的行政执法和对食(药)用菌菌种、产品及制品,食(药)用菌培养料及辅料,食(药)用菌栽培环境的质量监督检验及优质荣誉食(药)用菌产品的评选、复查、跟踪检查。
②受农业部或其它部门委托,对实施证书管理(如生产许可证、质量认证、进出口登记、推广许可证、产品登记等)的食(药)用菌产品进行检验,对重要新产品、新品种投产和科技成果的鉴定进行检验。
③承担农业系统食(药)用菌产品质量考核检验和产品质量分级检验;
④承担有关食(药)用菌产品的质量仲裁和其他委托检验;
⑤负责对有关企业和地方同类检验机构进行技术指导、技术咨询、技术服务和人员培训。
⑥研究食(药)用菌领域新的检测技术和方法,承担或参与相关国家标准、行业标准及企业标准的制定和试验性工作。
⑦对外承担有关菌种(均一性、真实性、结实性等)、感官指标(形状、大小、虫蛀菇、杂质含量等)、理化指标(水分、灰分及各种营养成分、多糖、粗蛋白、微量元素等各种有效成分)、卫生指标(重金属残留、农药残留等各种有害成分)和微生物指标(细菌总数、霉菌总数、各种致病菌等)的质检服务。
1.微生物农药农药在农、林业防治病害,除去杂草中起了巨大作用,特别是化学农药,但当前全世界化学农药年产量超过200万吨,有500多种在农业中使用,造成环境严重污染,生态遭到破坏,害虫抗药性大增,人畜常中毒伤亡。1992年世界环境与发展大会的决议中指出:要在全球范 围内控制化学农药的销售和使用,到2000年生物农药的产量将占农药总量的60%。微生物农药在生物农药中占有重要地位,也是各国竞相发展的产业,它是利用微生物本身或其代谢产物防治病、虫、杂草的制剂。已知的昆虫微生物病原体1000多种,细菌10多种,真菌750多种,其余为病毒、线虫、原生动物等,这些病原体都可作为防治害虫的资源开发利用。已商品化的微生物农药主要包括抗生素、细菌杀虫剂、真菌杀虫剂、病毒杀虫剂、细菌与病毒混合杀虫剂和微生物除草剂等。(1)细菌杀虫剂 苏云金芽孢杆菌杀虫剂,简称Bt杀虫剂。它是当今使用最多和最广泛的生物杀虫菌,对鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目、直翅目中的200多种昆虫都有毒杀作用,而且各亚种、各菌株所毒杀的昆虫对象不完全相同,有的对某种昆虫的杀灭的专一性强,毒力也高。它广泛地被用来防治农、林、果树、贮藏室和一些医学的害虫。Bt杀虫剂之所以成为国际上目前产量最大,应用面最广,深受欢迎的农药,除其杀虫效果好外,更重要的是对人、畜无伤害,安全;对植物也不产生药害,不影响农作物、树木、瓜果、烟、茶等的色、香、味;也不伤害害虫的天敌和有益的生物,能保持使用环境的生态平衡;对土壤、水源、空气环境不造成污染,有利于社会经济的持续发展。苏云金芽孢杆菌的杀虫机理主要是靠其芽孢和毒素。苏云金芽孢杆菌在菌体的一端形成芽孢,另一端形成近菱形的蛋白质晶体,即伴
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