讲义1肿瘤相关基因__培训课件.pptVIP

（五）原癌基因的甲基化程度降低而激活 DNA分子中的甲基化对于保持双螺旋结构的稳定， 阻抑基因的转录具有重要作用。 结肠癌和小细胞肺癌细胞中c-ras基因甲基化水平降低 癌基因及其产物的检测方法　　检测癌基因及其产物的标本可以是实体瘤和体液，前者需要提取DNA或RNA进行检 测，或经过组织切片以免疫组化方法检测基因表达产物，或者采用血尿标本，用 ELISA等法检测癌基因蛋白，几种主要检测方法介绍如下. (一)Southern杂交法 (二)原位杂交 (三)酶联免疫吸附试验 (四)免疫组化染色（五)PCR技术 (六)PCR相关技术  1.PCR-RFLP技术:PCR-RFLP全称多聚酶链反应(PCR)一限制性片段长度多态性 (restriction fragment length Polymorphism，RFLP)分析.PCR-RFLP主要有2个环 节:(1)靶基因PCR扩增;(2)扩增的DNA片段限制性酶切图谱(长度多态性). PCR -RFLP主要用于核酸变异性分析与比较。 2、PCR-SSCP技术:PCR-SSCP是聚合酶链反应一单链构象多态性分(single strand conformation polymorphism)的简称，原理是将经扩增的DNA片段经过变性处 理，形成单链，由于序列不同，单链构象就有差异在中性聚丙烯酰胺凝