初始污染菌验规程.doc

初始污染菌检验规程 1、准备工作 1）与供试液接触的所有器具应采用可靠方法灭菌，置压力蒸汽灭菌器内121℃30min。 采样数量：每批产品随机抽取10件样品. 检测标准《GB 15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准》：≤100cfu/件次。 洗脱液、稀释液采用0.9％无菌氯化钠溶液。 2、试验步骤： 1）用无菌手续取出10个样品，分别放入10支装有10ml0.9％无菌氯化钠溶液的试管中，将每个采样管震打80次，混匀，分别吸取1ml放入灭菌平皿，用普通琼脂培养基作倾注培养，置37℃温箱培养48±2h观察结果。 用肉眼直接计数，然后用5-10倍放大镜检查，有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辩时仍以2个或2个以上菌落计数。 计算公式为：菌数/件次=平均菌数×稀释倍数/件次。 阴性对照试验：将使用的0.9％无菌氯化钠溶液吸取1ml放入无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。制备2个平板均不得有菌生长。 3、注意事项： 1）在无菌操作台上做试验，防止环境对样品的再次污染，采取一切措施防止人为对样本的污染。 2）由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀的区别，必要时用显微镜鉴别。 编制： 审核： 批准：