現代分离技术.docVIP

1.结合自己的研究方向谈谈现代分离分析 的应用 2.质谱的分类及各自的特点 3.举例说明液质联用应用于复杂中药成分的定量分析? 4.UPLC的特点 5.离子色谱应用于单糖成分分析 6.全二维气相色谱分析技术 7.加压毛细管电色谱 特点 8.中药质量控制的模式，及其缺陷，如何改进？ 9.中药指纹图谱的特点和分类 2.质谱的分类及各自的特点 离子荷质比（电荷-质量比）的分析方法。 1） 2） 3）4） 5） 6） 4. UPLC特点 超高效液相色谱（UPLC）HPLC）相比, 原理上没有本质区别，但UPLC有两个技术特点：1、对于液相色谱而言，为了增加柱效，可以减小填料颗粒度，但是系统压力会随之上升，UPLC技术解决了整个系统在运行压力上的问题，仪器的连接系统、阀、配用的柱子等都能耐得起高压；2、在流速较高的情况下，柱效损失小，比如：如果使用2.1mm管径的柱子，最佳流速一般为0.2ml/min，但在流速升至0.5ml/min的情况下，柱效也很好。 所以UPLC具有以下优点 超高分离度 UPLC发挥了1.7 μm颗粒提供柱效增高的全部优越性。UPLC用1.7μm颗粒提高了分离能力，可以分离出更多的色谱峰，从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。而且又最大地缩短了开发方法所需的时间。HPLC不能分开的两个峰分开。 超高速度 由于UPLC系统用1.7μm颗粒，柱长可以比用5μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3倍的流速下进行，结果使分离过程快了多倍而分离度保持不变。其快速分析亦节省了以往一向耗时的方法认证的时间，使方法认证变得简单快速。 超高灵敏度 UPLC使用小颗粒技术可以得到更高的柱效（因而改善了分离度）、更窄的色谱峰宽，即更高的灵敏度。因为色谱峰变得更窄，峰高也就更高了；同样，当UPLC用于快速分析、用较短色谱柱而使柱效不变时，色谱峰高会相应增加。因此，使用UPLC技术，不仅可以在保持与HPLC相同分离度时提高峰高，而且在改善分离度的同时亦可提高峰高即灵敏度 因为以上三点优势,可以更快,更高效分离样品,所以节省很多溶剂,而且进样量减少,可以节省样品。 此外，UPLC与Q-TOF（四极杆飞行时间串联质谱仪）联用之后，能提高质谱分析的灵敏度，这也是UPLC具有的优势的体现。 5.离子色谱应用于单糖成分分析 2）检测原理 极表面发生 3）分离柱 如 6.全二维气相色谱分析技术 全二维气相色谱(Comprehensive Two-dimensional Gas Chromatography, GC×GC)是把分离机理不同而又互相独立的两支色谱柱以串联方式结合成二维气相色谱，在这两支色谱柱之间装有一个调制器，起捕集再传送的作用，经第一支色谱柱分离后的每一个馏分，都需先进入调制器，进行聚焦后再以脉冲方式送到第二支色谱柱进行进一步的分离，所有组分从第二支色谱柱进入检测器，信号经数据处理系统处理，得到以柱1保留时间为第一横坐标，柱2保留时间为第二横坐标，信号强度为纵坐标的三维色谱图，或二维轮廓图。 流程如下， 该仪器有如下特点： 峰容量大。具一次进样分出一万多个峰的能力。 灵敏度高。比通常的一维色谱提高20~50倍。 分析时间短，定性可靠性强，一个GC×GC方法可覆盖几个ASTM方法。 定性可靠性大大增强。三个因素对此起作用，第一，大多数目标化合物和化合物组可基线分离，减少了干扰。第二，峰被分离成容易识别的模式。第三，一个峰相对于同族的其它成员来说，在每次运行中其位置是稳定的。 由于系统能提供的高峰容量和好的分辨率，一个方法可覆盖原来要几个ASTM方法才能做的任务。 到目前为止，已有很多GC?GC应用的例子。其有用性正逐渐被人们所认识，可能的应用领域会比已开展的广泛的多。一般来说，当样品中物质的个数多于100时，使用GC?GC会比一维GC好得多。当柱系统选择得当时，此种技术更适于需族分离的复杂样品分析。即使样品中物质个数在30~100间，GC?GC也会具显著优越性。尽管GC?GC最适合于分离复杂混合物，但它也适用于对相对简单的混合物进行快速扫描分析。 7加压毛细管电色谱 特 毛细管电色谱以内含色谱固定相的毛细管为分离柱，靠外加电场作用于毛细管内壁的双电层而产生的电渗流来驱动缓冲溶液，使带电物质因电泳淌度的差异而得到分离既可以分离带电物质也可以分离中性物质。与液相色谱相比，采用推动流动相，使流动相流形呈柱塞状，大大地减少了色谱过程中的峰展宽，同时因不受柱内反压的限制，可使用比液相色谱更小颗粒的填料，使柱效、分辨率、峰容量和分离速度都得到极大的提高。它结合了毛细管电泳和高效液相色谱两者的优点，兼具高柱效、高分辨率、高选择性和高峰容量的特点，同时具有色谱和电泳的双重分离机理