現代生化技术复习题.docVIP

. 第一章 提取与分离技术 一、名词解释 1、机械破碎法 2、物理破碎法 3、温度差破碎法 4、压力差破碎法 5、超声波破碎法 6、渗透压变化法 7、化学破碎法 8、酶促（学）破碎法 9、自溶法 10、抽提 11、盐溶 12、盐析 13、沉淀分离法 14、分段盐析 15、KS分段盐析 16、β分段盐析 17、等电点沉淀法 18、有机溶剂沉淀法 19、复合沉淀法 20、金属盐沉淀法 21、选择性变性沉淀法 二、填空题 1、细胞破碎的方法有 、 和 。 2、机械破碎法按照使用机械的不同可分为 、 和 。 3、常用的物理破碎法有 、 和 等。 4、常用的压力差破碎法有 、 和 等。 5、化学破碎法采用的表面活性剂有 和 两种。其中之一按其带电荷性质又可分为 和 两种。 6、根据抽提时所采用的溶剂或溶液的不同。抽提的方法主要有 、 、 和 等 7、常用的沉淀分析法有 、 、 、 、 和 等。 8、常用的金属盐沉淀法有 和 。 9、蛋白质盐析时，带入大量盐离子杂质，可采用 、 和 方法脱盐。 10、要分离和提纯核酸过程中，常用 来沉淀DNA和RNA。 11、常用的使蛋白质沉淀的方法有 、 、 、 和 等。 12、 三、是非题（对的打√、错的打×） 1、渗透压变化法可用于革兰氏阳性菌的破碎。（ ） 2、有机溶剂破碎细胞主要是使细胞膜磷脂结构破坏，从而使细胞膜的透过性增强。（ ） 3、用化学法破碎细胞提取酶时，经常用离子型表面活性剂。（ ） 4、用化学法破碎细胞提取酶时，用非离子型表面活性剂最好。（ ） 5、对于具有细胞壁结构的细胞采用酶法破碎时，应根据细胞壁结构选择不同的酶。（ ） 6、酸性物质易溶于酸性溶剂中，碱性物质易溶于碱性溶液中。（ ） 7、在等电点时两性电解质溶解度最小。（ ） 8、抽提两性电解质时应避开其等电点。（ ） 四、选择题 1、利用突然降压法破碎革兰氏阴性大肠杆菌应选择 期的细胞破碎效果最佳。 A 调整期 B 对数生长期 C 平衡期 D衰退期 2、提取膜结合酶采用 法破碎细胞最佳。 A 高压冲击法 B 突然降压法 C 渗透压变化法 3、超声波破碎法最适合于 破碎。 A 动物细胞 B 植物细胞 C 微生物细胞 4、利用超声波法破碎微生物细胞对 期的细胞破碎效果最佳。 A 调整期 B 对数生长期 C 平衡期 D衰退期 5、破碎革兰氏阳性菌选用 。 A 溶菌酶 B β-葡聚糖酶 C 几丁质酶 6、破碎酵母细胞选用 。 A 溶菌酶 B β-葡聚糖酶 C 几丁质酶 7、破碎霉菌选用 。 A 溶菌酶 B β-葡聚糖酶 C 几丁质酶 8、纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶共用适合破碎 。 A 动物细胞 B 植物细胞 C 微生物细胞 9、胰蛋白酶可采用 提取。 A 盐溶液 B 酸溶液 C 碱溶液 D 有机溶剂 10、在提纯α-淀粉酶时，常采用 。 A 盐析沉淀法 B 有机溶剂沉淀法 C 复合沉淀法 D 选择性变性沉淀法 11、在DNA提取中起沉淀DNA作用的是 。　　 　A、EDTA　 B、SDS C、酚　 D、无水乙醇 五、简答题、 1、细胞破碎有哪些方法？ 2、突然降压法破碎细胞的效果取决于哪几个因素？ 3、抽提有哪些方法？ 4、沉淀法有哪些？ 5、蛋白质盐析沉淀时为什么选择中性盐硫酸铵？ 6、蛋白质用硫酸铵沉淀时应注意哪些事项？ 六、问答题 1、试论述影响有效成分抽提的因素。 2、试用三种或三种以上的方法分离RNA和DNA。 3、用以下原料试剂，设计一个实验来提取RNA（粗品） 原料：干酵母粉。 试剂：0.2%氢氧化钠溶液;乙酸;95%乙醇;无水乙醚 仪器; 自选,但必须为生化实验室常用仪器。 4、请设计一种方法来纯化真核细胞裂解液中的成熟mRNA。 第二章 过滤与膜分离技术 一、名词解释 1、过滤