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生物工程生物技術专业英语翻译(三)
第三章 应用遗传学
生物工程发展的第一步通常是寻找合适的有机体。这种有机体期望能够创造一种产品或者服务从而给其工业带来商业回报。实际中,遗传学家必须选择一个有机体,这个有机体能够生产出想要的产品。一旦找到合适的有机体,在可能发生诱导遗传变化的地方利用传统育种和诱变方法就可以生产出更多的想要的产品。对改造过的有机体的选择工作是乏味而耗时的,并且直到最近遗传学家能够采用的大部分方法都还涉及试验和错误。然而,新的基因技术,例如原生质体融合和重组DNA技术的使用使得通过采用新方法就能将有用的遗传特征直接插入到所选择的有机体中。这样,就能够设计建造出完全新的性能(capabilities),而且尤其是微生物以及小部分植物和动物细胞就超越了它们天生所赋予的遗传能力而生产物质。
当应用遗传学家对一个潜在的工业有机体进行操作的时候,生产能力的提高并不是唯一的目标。因此,对病毒的防御能力和提高的遗传稳定性可以被引入到有机体内,从而缺少它们,就能减少或消除有害的副产品的形成并且可以除去令人不快的味道、颜色或者粘质物。
一个成功的工业化培养物应该最终具有大部分或者全部下列特点:这个培养必须是纯培养物,遗传稳定;容易繁殖;具有快速生长的特点;具有良好的产品形成速度;不产生有毒的副产品;并且能够行基因操作。
工业上所用的培养物通常有三种应用:(1)作为一种研究培养物——对它进行研究已寻找一种有用的产品;(2)作为一种发展培养物——一个研究培养物获得了重要性;和(3)作为一种生产培养物——一个研究培养物现在实际上用来进行工业化生产。
最终的培养物可以与原始的研究培养物相同,但更常见的是,将它经过一系列的处理,以提高产率。这个最终的工业有机体将被进行遗传设计,从而使它的代谢功能远超过野生型的代谢功能。这个只能通过在生产过程中对有机体的生长进行最大的控制得以实现。从一个野生型发展到工业有机体需要改变它的遗传信息,消除不要的特点或者甚至是引入整个新的遗传信息。
寻找所要的有机体并且提高它的性能(capabilities)是目前大部分生物工程过程的最基本的方面(图3.1菌株改造流程图)
3.1 选择与筛选
在生物技术的所有方面中,最主要的精力都用在了筛选程序(progaramme)上, 以通过突变或者杂交程序(progaramme)包括遗传设计的途径,从天然资源或者已经建立的培养物中生产出新的有机体。这些有机体必须经过筛选来获得有用的产品并且可以进行足够大规模的生长以生产和提取所期望的产品,然后对这个产品进行鉴定评估(evaluation)。筛选可以定义为利用高效选择程序从庞大的微生物与代谢物中只检测和分离那些有益的微生物与代谢产物。对分离物进一步的改进包括对培养物的改造与保存。然而,对充分利用这个能力来说最大的障碍是适宜的筛选程序的可行性,这个筛选程序能鉴别所必需的产物,尤其在存在培养基组分的情况下。
现在生物工程中利用的主要的生物群体是微生物。所述的筛选方法也主要集中于这类群体。
在从环境中为生物工程寻找新的微生物的过程中,一般有三种可行性的选择;它们包括取样点的选择,分离出想要的微生物的物理分离过程以及实现选择的方法的选用,这个过程大多数情况下要进行富集培养(表3.1生产微生物的创造)。
尽管许多新的生产微生物是野生型而且已经从自然环境中分离出来,但是通过实验操作从现存的基因组制造新的基因组同样花费了大部分的精力。通过突变、重组、转化、转导和基因克隆的单一处理过程或者联合处理过程可以对有机体进行改造(表3.1生产微生物的创造)。。
通过自然选择,尤其更多的是基因操作,所有工业重要的微生物都将经过某些形式的筛选。筛选程序的设计对实现最大程度的认知新基因性来说是很重要的。筛选可分为两个基本形式:
无选择的随机筛选 对所有分离物进行单独检测,以获得所要的性质
比率筛选 在这个过程中,会进行某些方面的预筛选。
随机筛选将是非常耗时的,因为每个分离物都要进行仔细的研究。在抗生素生产的研究中,成千上万的摇瓶培养的单一孢子分离物进行有规律的使用。Agar disc琼脂板 技术加快了这个过程,但这个方法最好是用作在使用摇瓶之前作为一种最初的筛选。大量的分离物或者突变体现在就可以平铺开来,暴露于广泛的环境条件下,同时任意时间段的反应就可以通过电视监控或者计算机控制而被自动记录下来。
相反的,比率筛选更多的是利用了特定产物形成的生物化学知识,建立一个选择过程,这个过程利用了所要的基因型的一个特点,这个特点不是特定的有益的那一个,但必须是很容易进行评价scored或者assayed化验。比率筛选应该有选择的杀死所有不需要的基因型从而允许routinely检测更多的分离物。因此,最近已表明in Cephalosporium acremonium抗生素的生产与蛋白水解活性prote
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