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2010生物技术制药复习提纲 基本概念 质粒:细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物，包括生物技术药物和原生物制药。这类细胞的生长必须有可以贴附的支持物表面,细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长，繁殖。只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体，来自单个Ｂ淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。 由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）的高纯度抗体。将鼠源抗体的可变区与人源抗体的恒定区融合而制成的抗体。其具有鼠源抗体结合抗原的特异性和亲和力，同时降低了鼠源抗体对人体的免疫原性。 是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。 某种组织细胞去分化后变为原始未分化状态，随后分化为另一种组织细胞的过程。多存在于再生过程中。 原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。 继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，这种转移称为继代培养或传代培养。水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。在催化反应中以固相状态作用于底物。 用合成高分子来模拟酶的结构、特性、作用原理以及酶在生物体内的化学反应过程Ig（免疫球蛋白）分子的基本结构是由四肽链组成的。即：由二条相同的分子量较小的肽链(轻链)和二条相同的分子量较大的肽链(重链)组成。 轻链与重链是由二硫键连接形成一个四肽链分子称为Ig分子的单体；单体是构成所有免疫球蛋白分子的基本结构；所有抗体的单体都是四条肽链的对称结构，即：两条糖基化重链(H)和两条非糖基化轻链(L)；每条重链和轻链分为氨基端(N端)和羧基端(C端)。 L链N端1/2处（VL）108-111个氨基酸残基，H链N端1/5-1/4处（VH）118个氨基酸残基，V区有一个肽环65-75个氨基酸残基。通过对H链或L链的氨基酸序列比较分析，发现： 　　其N-末端序列变化很大，称此区为可变区（V区）；可变区可分为高变区（HVR）和骨架区（FR），高变区为抗体与抗原的结合位置，称为决定簇互补区（CDR），VL和VH的HVR1，HVR2，HVR3又分别称为CDR1，CDR2，CDR3，其中CDR3具有更高的高变程度，H链在与抗原结合中起重要的作用。 C-末端氨基酸则相对稳定，变化很小，称此区为恒定区（C区）在同一种属动物中是比较恒定的，是制备第二抗体进行标记的重要基础。 链内二硫键折叠成球形区称为功能区氨基酸的顺序具有高度的同源性。功能区的作用：（1）VL和VH是抗原结合的部位。（2）CL和CH1上具有同种异型的遗传标记。（3）IgG的CH2和IgM的CH3具有补体C1q结合位点；IgG借助CH2部分可通过胎盘（4）CH3或CH4具有结合单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、B细胞、NK细胞Fc段受体的功能，不同的抗体可与不同的细胞结合，产生不同的免疫效应。B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。 固定化酶反应器的类型特点及选择依据 一、反应器的类型和特点 ⒈ 间歇式搅拌罐反应器：用于游离酶反应后随即放料。 ⒉ 连续流动搅拌罐反应器：连续进料、连续出料 ⒊ 填充床反应器： 固定化酶填充于床层内。反应器内的流体的流动形态为平推流形。底物以恒定流速通过反应床。 ⒋ 流化床反应器： 底物以足够大的流速向上通过固定化酶床层，使固体颗粒处于流化状态，达到混合的目的 ⒌ 循环反应器 部分反应液流出和新加入底物流入液混合，在进入反应床进行循环。 ⒍ 连续流动搅拌罐-超滤膜反应器 由连续流动搅拌罐反应器和超滤装置组合而成的反应器。它在连续流动搅拌罐的出口处装有半透膜 二、反应器的选择依据 ⒈ 根据固定化酶的形状来选择 ⒉ 根据底物的物理性质来选择 ⒊ 根据反应的动力学特性来选择 ⒋ 根据外界环境对酶的稳定性的影响来选择 ⒌ 根据操作要求及反应器费用来选择 实践与进展 已知拟南芥中一个序列已知、编码单体酶蛋白的基因在单细胞微生物中表达，确保得到产物？某质粒载体具有Tetr和Kanr表型，在K