3种5’race技术的比较与优化.docVIP

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2017-01-15 发布于天津
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种技术的比较与优化摘要目的研究环化法末端脱氧核糖核酸转移酶法和反转录酶法种常用的技术的特点并对它们进行了优化方法以播娘蒿为模板先按文献标准方法进行然后通过增加反应时间提高部分反应物浓度等方法进行优化结果未优化前环化法和酶法条带几乎不可见反转录酶法隐约可见条带但不清晰优化条件后环化法出现弥散条带酶法胜之但条带依旧弥散而反转录酶法最佳获得清晰特异性条带结论效果最好其次为酶法环化法效果有待改进同时通过优化条件可以明显增加产物的特异性为实验研究中方法的选择提供了依据关键词比较优化经典克隆未知基因的方法比

3种5’RACE技术的比较与优化【摘要】nbsp; 　　目的研究环化法、末端脱氧核糖核酸转移酶法和SMART反转录酶法3种常用5RACE的技术的特点，并对它们进行了优化。方法以播娘蒿RNA为模板，先按文献标准方法进行5RACE，然后通过增加反应时间，提高部分反应物浓度等方法进行优化。结果未优化前环化法和TdT酶法条带几乎不可见，SMART反转录酶法隐约可见条带，但不清晰。优化条件后，环化法出现弥散条带，TdT酶法胜之，但条带依旧弥散，而SMART反转录酶法最佳，获得清晰特异性条带。结论 SMART 5RACE效果最好，其次为Td