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动物细胞培养与核移植
动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 问题讨论: 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,使用他人皮肤来源不足,而且会产生排异反应。请同学们想一想如何来治疗该病人? 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 (3)动物细胞生长特性: 传代培养 定义:将动物组织消化后的初次培养称为原代培养 有关概念: 探究: 探究: 【资料一】细菌、真菌和病毒等均可造成细胞培养环境的污染,而离体培养的细胞已经失去了对微生物和有毒物质的防御能力,一旦受到污染或自身代谢物质积累等,培养的细胞就会死亡。 探究: 【资料二】培养的细胞就像体内细胞一样,需要一些基本的营养物质和生长因子,如氨基酸、葡萄糖、无机盐、维生素、核苷酸等。不同组织来源的细胞需要不同的生长因子,而且需求量也不同,所以必须精心设计这些成分的搭配比例。 探究: 【资料三】人体细胞培养的标准温度为( 36.5+(-)0.5度),偏离这一温度范围,细胞的正常代谢就会受到影响。培养的细胞对低温的耐受能力比高温的耐受力大。 探究: 【资料四】开放培养时一般把细胞置于95%空气和5% 二氧化碳的气体环境中。氧气参与细胞呼吸作用,二氧化碳可以维持培养基的PH。 5、应用 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体) 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据 离体的植物组织或细胞在适当的培养条件下可发育成完整的植株,那么,是否能用类似的方法使动物细胞发育成一个完整的动物个体呢? 将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎, 这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、过程 3、应用前景 (1)加快家畜遗传改良进程 (2)保护频危物种 (3)利用生物反应器生产生物蛋白 (4)器官移植供体 4、存在问题 成功率低 存在健康问题 克隆动物食品的安全问题 1、在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到 A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术 2、从母羊甲的体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核的卵细胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宫内,出生小羊的大多数性状 A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙 3、生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是 ( ) A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培养成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 D B 课堂检测: C * * 复习: 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 植物组织培养、 植物体细胞杂交 强调: 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植 1、概念 2、原理 细胞增殖 (1) 选材: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 3、培养过程: 原因:它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。 (2)处理: 分散成单个细胞,制成细胞悬液 在进行动物细胞培养时,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞。 既然用胰蛋白酶等处理细胞,表明细胞间的物质是蛋白质,用胃蛋白酶行吗? 想一想: 不行,因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 ①细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上, 要求: 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 ②细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会 停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬液 部分细胞无限传代 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 细胞贴壁 原代培养 传代培养 胰蛋白酶 10代细胞 50代细胞 (4)具体过程 (4)具体过程 细胞悬浮液 1
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