基础分子生物学22转录激活.pptVIP

Chapter 22 22.2 There are several types of transcription factors. ?转录因子的分型. 基本转录复合体决定了转录起始点. 激活剂决定了转录频率. 激活剂与基本转录因子通过蛋白质-蛋白质相互作用而发挥其功能. 激活剂可能通过辅激活剂而起作用. 转录复合体的一些成分通过改变染色质结构而起作用. 基因表达中的因素包括RNA聚合酶和基本转录复合体,启动子或增强子直接结合于DNA的激活剂,结合于激活剂和基本转录复合体的辅激活剂和作用于染色质的调节因子. 22.3 Independent domains bind DNA and activate transcription. DNA结合和转录激活的结构域是相互独立的. 激活剂有着独立的DNA结合域和转录激活域. DNA结合域的作用是将转录激活域带到启动子的邻近区域. 转录因子中的DNA结合和激活功能可能组成了蛋白质的独立结构域. GAL4激活转录的能力与其DNA特异性结合能力是互相独立的. 当GAL4 DNA结合域被LexA结合域替换掉, 并将一个LexA操纵基因置于启动子附近时, 杂合蛋白就激活转录. 如果HIV的tat蛋白的转录激活域被上一轮转录的RNA产物拉到基本转录复合物附近, 它就能激活转录的起始. 激活在这里是一个独立的事件, 就如RNA结合域被DNA结合域置换后所显示的那样. 22.4 The two hybrid assay detects protein-protein interactions. 双杂交法检测蛋白质-蛋白质相互作用. 双杂交实验原理需要两种蛋白质之间的相互作用, 其中一种蛋白质含DNA结合域, 而另一种蛋白质含转录激活域. 通过融合技术我们得到杂合蛋白, 使得一些蛋白质有DNA结合域, 另一些有转录激活域, 这样, 双杂交技术就能检测两个蛋白质的相互作用. 指导激活剂作用的原则是DNA结合域决定了它所结合的靶启动子或增强子的特异性. DNA结合域负责将转录激活域定位于基本转录复合体的附近. 能直接起作用的激活剂含有DNA结合域和转录激活域. 没有转录激活域的激活剂通过结合辅激活剂而起作用, 而辅激活剂则含有转录激活域. 基本转录复合体的几个因子是激活剂或辅激活剂相互作用的靶. RNA聚合酶与各种组合的转录因子连接在一起, 组成了全酶复合体. 一个上游转录因子可以结合一个辅激活剂,由后者与基本转录复合体接触. 它们通过与TFIID的TAF接触或是与TFIIB接触, 激活剂可以在起始的不同阶段发生作用. 22.6 Some promoter-binding proteins are repressors. ?某些启动子结合蛋白是阻抑物. 阻遏通常影响染色质结构来完成, 但也有阻抑物通过结合特异启动子而起作用. 在海胆睾丸组织的H2B基因的启动子中, 转录复合体包含了几个元件的识别. 在胚胎组织中, CAAT置换蛋白阻止了CAAT结合因子的结合,所以活性复合体不能形成. 22.7 Response elements are recognized by activators. ?激活剂能识别应答元件. 应答元件可能位于启动子或增强子中. 每个应答元件能被特异的激活剂所识别. 启动子可有很多应答元件, 它们可以独立地或以某种组合的方式激活转录. 人类金属硫蛋白(MT)基因调控区的启动子和增强子中都含有调控元件, 启动子含有对金属诱导应答的序列, 增强子含有对糖皮质激素应答的序列. 启动子中的有关序列在图的上面标出,下面是与之结合的各种蛋白质. 22.8 There are many types of DNA-binding domains. ?多种类型的DNA结合域. 激活剂可根据DNA结合域分型. 同组成员的特异基序可以有所不同, 从而赋予不同单一靶标的特异性. 控制转录调控因子活性的机制有多种, 可以是蛋白质合成,蛋白质共价修饰,配体结合,也可以是影响转录因子与DNA结合甚至只将蛋白质与DNA隔离的各种抑制剂. 22.9 A zinc finger motif is a DNA-binding domain. ?锌指基序是一种DNA结合域. 锌指包含约由23个氨基酸残基组成的环, 它伸出锌结合位点, 而锌结合位点由半胱氨酸和组氨酸组成. 锌指蛋白常有多个锌指. 锌指的C端形成螺旋, 它结合一圈DNA大沟. 某些锌指蛋白结合RNA和(或)DNA. 转录因子SP1有一系列的三锌指结构, 每个锌指的锌结合位点都有半胱氨酸和组氨酸的特征性模式. 锌指可以形成?螺旋而插入DNA的大沟中, 在另一面连着?片层. 22.10 Steroid receptors are activators.类固醇受体是激