2010年5月9日动物细胞融合与单克隆抗体研讨.pptVIP

植物体细胞杂交过程示意图 6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 2.3单克隆抗体的应用 * 2002年１２月３０日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明，细胞融合率大大提高。 STS “太空婚礼” 神舟放飞强国梦 “太空婚礼”科研项目一： “太空婚礼”科研项目二： 挑战自我 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) “太空婚礼”植物科研项目计划书 用途 　　 促融方法 融合前处理 原理 植物体细胞杂交 项目 第四步 第三步 第二步 过 程 第一步 细胞膜的流动性、细胞的全能性 酶解法去壁 物理法　化学法 原生质体的制备 原生质体的融合与筛选 杂种细胞的形成与培养 杂种植株的鉴定与筛选 克服远缘杂交不亲和获得具优良性状的杂种植株 同核体 同核体 异核体（杂交细胞） 人工诱导 还有3个3个以上细胞的融合------- 物理法 的融合效率较高,且对细胞（原生质体）的伤害小,易操作、控制和观察。 太空中处于失重状态，不同种细胞（原生质体）更容易亲近； 为什么在太空中细胞（原生质体）融合率会大大上升？为什么选用物理法诱导？ 请同学们阅读课本P52动物细胞融合内容 问题：什么是动物细胞融合？它相当 于植物体细胞杂交过程的哪一步？它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？ 1.1动物细胞融合过程、原理与诱导方法 为什么灭活的病毒能作诱导剂？ 1.1动物细胞融合过程、原理与诱导方法 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活丧失感染性 保留融合活性 鼠B淋巴细胞 鼠骨髓瘤细胞 人工诱导 1.2动物细胞融合的概念 杂交瘤细胞 动物细胞融合（技术）：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 制备单克隆抗体 用途 诱导方法 细胞融合的方法 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 问题：抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？ 2.1单克隆抗体的概念 抗体是机体受抗原刺激后由效应B细胞（浆细胞）产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 主要分布在血清。 一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。教材中所说的抗原分子刺激淋巴细胞，说的也就是抗原决定簇刺激B淋巴细胞，使其分裂分化出特异性的效应B细胞，分泌特异性抗体。 抗体的传统生产方法 从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 多种效应B细胞 动物体内 多种抗体 抗原 读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 2.1单克隆抗体的概念 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 不行。在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 肿瘤细胞 问题：如何大量生产单克隆抗体？ 2.2单克隆抗体的制备 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞 实验目的:制备单克隆抗体 1975年英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒的实验 2.2单克隆抗体的制备 看书上53页图，分组讨论，单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？