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专题4 酶的研究与应用 酵母细胞的固定化 * . 一、课题目标 1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 2.尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 * 二、课题重点与难点 1.课题重点:制备固定化酵母细胞。 2.课题难点:制备固定化酵母细胞。 * 什么是固定化酶? 水溶性酶 水不溶性载体 水不溶性酶 (固定化酶) 固定化技术 * * * 固定化酶技术的优点和缺点 优点: 1.不溶于水,易于与产物分离; 2.可反复使用; 3.可连续化生产; 4.稳定性好。 缺点: 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。固定化过程中往往会引起酶的失活. * 固定化细胞技术的优点和缺点 优点: 成本低,操作更容易。 缺点: 固定后细胞或其产生的酶与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。 * 1.从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易?哪一种方法对酶活性的影响更小? 2.固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶? 3.如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法? 4.如果反应物是大分子物质,又应该选择哪种方法? 为什么? 【课堂讨论】 固定化细胞,固定化细胞 一系列酶 固定化细胞 固定化酶 * 三、实验设计 酵母细胞的活化 配制CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合 固定化酵母细胞 冲洗凝胶珠 酒精发酵 请写出酵母细胞固定化的实验流程图? * 1.什么叫酵母细胞的活化? 2.配制的海藻酸钠溶液具体作用是什么?在加热的过程中,为什么要用小火,或者间断加热? 3.为什么刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30min左右? 4.如何检验凝胶珠的质量是否合格? 问题思考? * 四、结果分析与评价 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。 问题思考:①如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,则说明什么?②如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明什么? * 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。 当观察到哪些现象时,可说明实验获得成功?为什么? * 思考 列表比较直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点。 类型 优点 不足 直接 使用酶 固定化酶 固定 化细胞 催化效率高,低耗能、低污染等 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用 成本低,操作更容易 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。 * 五、本课题知识小结 * 专题4 酶的研究与应用
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