02练习徒手切片.docVIP

练习徒手切片，观察植物器官 掌握生物玻片标本制作的常规方法，了解石蜡切片的制作方法。 【实验材料】 胡萝卜、马铃薯、、植物鲜茎叶、植物干茎叶植物根、茎、叶的永久切片等等。 【实验用具】 显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、剃刀、培养皿、吸管、解剖工具、酒精、甘油、番红【实验内容】 植物徒手切片的制作与封藏 植物形态解剖学实验教学中，最简单和常用的切片法是徒手切片法。徒手切片法简称手切片法。一般是指材料和刀片（或剃刀）都握在手里所进行的一种切片方法。材料是新鲜的，有时也用预先固定好的。这种切片方法，虽然有其缺点，如：不易做到将整个切面切得薄而完整，往往切出的片子厚薄不一；过软或过硬的材料比较难切。但也有许多优点，如：工具简单，只要有一把锋利的剃刀或双面刀片就够了，方法简单，容易学会；制片时间短，只要有现成材料，可以立刻用刀片切成薄片，当即观察，即便要染色，时间也不长；还有一个独特的优点就是可以看到原来的天然颜色。 徒手切片法，由于具备上述优点，可以说不需要任何特殊设备，简便易行，省时间又省资金，因此具有普遍应用的适应性。不仅适于基层科学研究单位从事研究观察时用，更适合用于中学教学中使用，因为中学一般不具备切片机，而中学生物教学中所用切片，又多是属于形态构造方面的内容，因比可以通过徒手切片给学生做示范观察，或者让学生用现成材抖，亲自动手切片，使他们将从外观看到的生物的外部形态和显微镜下所看到的内部解剖构造联系起来，加深机能与构造是统一的慨念。从这-意义来讲，徒手切片的制作是重要基本技能之一。 一般材料的徒手切片制作方法 (1)材料和刀片的握法：制手切片前，首先将材料切成长约2-3厘米的小段。手持材料时，左手拇指和食指夹住材料。为防止刀伤，拇指应略低于食指。为便于徒手切，材料的上端应高于拇指和食指，但不必高出很多，高出过多切削时材料容易动摇。握材料时要注意，一定要使材料的轴面与水平面互相垂直。对双面刀片用右手拇指和食指横向平握其右角，对于单面刀片则用大姆指和中指夹住刀片右后角，食指顶住刀片左前角，刀口向内，然后置于左手食指之上，刀片要与材料的纵轴相垂直。 （2）切片法：切片前，先将材料和刀口上蘸些水，使之切时滑润。切时，先切去材料上端一段，使截面平整。切的方法，以刀口自外侧左前方向内侧右后方斜切，这样可以边切边看清切片的进展情况，同时切起来也比较顺手。不要向内平切或向外切，切片时切忌中途停顿或推前拖后作“拉锯”式切割。左手保持稳定，不要两手同时拉动。注意切片时两手不要紧靠身体或压在桌子上用臂力而不要用腕力及握刀指关节的力量。每切2-3片后就把所切材料的薄片用蘸水毛笔移入盛有清水（或50-70％酒精）的培养皿中，以备取用。尽量不要切斜，如发现切面出现倾斜应立即修正，切平，然后再继续切片。 （3）如何选片：切下的薄片，移入盛水的培养皿里后，检查一下可见有各种情况：材料完整但很厚；材料完整但厚薄不均，材料不完整但很薄；材料完整而且全面薄。这几种薄片中，当然以最后者为最理想，但其他的片子并不全是废片。如有时只需观察局部就足以了解整体的构造时，虽然材料不完整，但局部切片尚薄，或材料完整，仅局部切的薄的片子均可以选用观察。如玉米茎横切片，只要有四分之一或者更少的小片，就可以看出内外维管束的大小、多少及每个维管束的构造，所以切下的切片不是每一片都适用，也不是只有全面切得薄的才能用，要根据需要选择，一次可以多选几片置于裁玻片上，滴水制成临时水装片，通过镜检再进一步选择理想的材料用以观察。同时也可以通过镜检找出自己制片中的缺点和问题，以求改进。 2．柔软和坚硬材料的切法??过于柔软的材料，如植物的叶片或其他薄而微小的材料，难以直接执握手切，则须夹入坚固而易切的维持物中切。常用的维持物有胡萝卜（用胡萝卜时可将中间硬心即木质部切除，用其余部分）、马铃薯块茎、接骨木的髓部及通草髓等。但须要注意的是通草髓遇水即变软，可将其保存在酒精中留作切片或用于夹持材料。切前先把夹持物切成长方小体，上端与纵轴垂直面削平，若被切材料属叶状体一类的薄片，从上至下纵切一缝，将材料夹于其中即可，如不是叶状体，即将材料夹于其中，或根据材料不同在缝里挖一个和材料形状相似，大小相等的凹陷，把材料夹在凹陷里。然后用手握紧夹持物，将夹持物和其中的材料一齐切成薄片，除去夹持物的薄片，便得到材料的薄片。 坚硬的材料要经软化处理后再切。软化方法：-种是对于比较硬的材料，先切成小块，后进行煮沸，经3-4小时煮沸后，再浸入软化剂（50％酒精∶甘油=1∶1）中数天至更长些时间，而后再切。另一种，对于已干或含有矿物质，比较更硬的材料，要先在15％氢氟酸的水溶液中浸渍数周，充分浸洗后，再置入甘油里软化后再切。 3、切片的封藏??用徒手切片法获得的植物根、茎、叶的切薄材料，组织离析材料，花粉粒或低等植物类的单细