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革兰氏染色原理: 革兰氏染色的阳性或阴性,与细胞壁的化学组成和结构有关。 革氏阳性菌 革氏阴性菌 肽聚糖 含量高,交联密 含量低,交联疏松 脂类 一般无 含量高 乙醇作用 脱水作用 脂溶作用 孔径缩小,结构更紧密 孔径增大,结构变得疏松 大分子复合物滞留 大分子复合物溶出 结果 紫色 红色 细胞壁结构与革兰氏染色的关系 革氏阳性菌与革氏阴性菌之间的区别在于细胞壁的物理性质。细胞壁中的肽聚糖本身并不被染上颜色,但它可作为渗透性屏障阻止结晶紫与碘大分子复合物的流失。 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 青霉素的杀菌作用原理: 青霉素b-内酰胺环结构与D-丙氨酸末端结构相似,占据D-丙氨酸的位置与转肽酶结合,肽链无法连接,抑制细胞壁的合成。 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 溶菌酶的作用: 通过水解肽聚糖分子中N-乙酰葡萄糖胺与N-乙酰胞壁酸间的β-1,4-糖苷键,引起细胞壁“散架”,形成细胞壁完全脱去或部分除去的原生质体(革氏阳性菌)或球状体(革氏阴性菌) 。 在低渗溶液中,原生质体或球状体因吸水膨胀并最终导致破裂而死亡; 在等渗蔗糖溶液中,能得到原生质体或球状体。 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 自发突变:L型细菌 实验室或宿主体内形成 基本去尽:原生质体(G+) 缺壁细菌 人工去壁 部分去除:球状体(G-) 在自然界长期进化中形成:支原体 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 (1)L型细菌(L-form of bacteria) 细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体内)通过自发突变 而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。 因英国李斯德(Lister)预防研究所首先发现而得名 (1935年,念珠状链杆菌 Streptobacillus moniliformis) 特点 没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态; 有些能通过细菌滤器,故又称“滤过型细菌”; 对渗透敏感,在固体培养基上形成“油煎蛋”似 的小菌落(直径在0.1mm左右); (2)原生质体(protoplast) 在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养而 抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的,圆球形、 对渗透压变化敏感的细胞,一般由革兰氏阳性细菌形成。 特点: 对环境条件变化敏感,低渗透压、振荡、离心甚至 通气等都易引起其破裂; 有的原生质体具有鞭毛,但不能运动,也不被相应 噬菌体所感染; 在适宜条件(如高渗培养基)可生长繁殖、形成菌 落,形成芽孢。及恢复成有细胞壁的正常结构。 比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质,是 研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 (3)球状体(sphaeroplast) ,又称原生质球 采用上述同样方法,对革兰氏阴性细菌处理后而获得 的残留部分细胞壁(外膜)的球形体。与原生质体相比, 它对外界环境具有一定的抗性,可在普通培养基上生长。 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 4. 细胞壁缺陷细菌 (4)支原体(Mycoplasma) 在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。因它的细胞膜中含有甾醇(一般原核生物没有), 所以即使缺乏细胞壁,其细胞膜仍有较高的机械强度。 二、细菌细胞的构造与功能 (一)细胞壁(cell wall) 5.古生菌的细胞壁: 在古生菌中,除了热原体属没有细胞壁外,其余都具有与真细菌类似功能的细胞壁,但细胞壁的化学成分则差别很大。 古生菌细胞壁中没有真正的肽聚糖,而是由假肽聚糖、独特多糖、
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