酶法制备的大米免疫活性肽分离纯化的讲义.docVIP

湖南省研究生科研创新项目 申 请 书 项目名称： 酶法制备的大米免疫活性肽分离纯化的研究 申请者： ***** 所在单位： 长沙理工大学化学与生物工程学院 所属学科： 食品科学 联系电话： ***** 传真电话： ****** 电子信箱： ****** 申请日期： ***** 湖南省教育厅 2013年制 填 报 说 明 一、申请书各项内容，要实事求是，逐条认真填写。表达要明确、严谨。外来语要同时用原文和中文表达。第一次出现的缩写词，须注出全称。除签名外，项目申请书必须是打印件。 二、申请书一律用A4纸，于左侧装订成册。第二页起各栏空格不够时，请自行加页。如有查新报告及其它附件材料，请连同申请书一起装订成册。 三、“所属学科”按博士、硕士学科专业目录（2006年修订版）二级学科名称填写。 （封2，此页不装订）  二、立项依据 （项目的研究目的、意义；国内外研究现状分析和发展趋势；项目应用前景和学术价值；现有研究基础、条件、手段以及指导教师情况等） 1. 项目研究目的、意义 1.1 大米蛋白深加工既可提高经济价值又可避免资源浪费 大米的营养十分丰富，是中国人民的主要食粮之一，中国稻谷产量占世界总产量的1/3以上，我国人口中有65%以水稻为主食，特别是在南方。大米中含碳水化合物75%左右，蛋白质7%~8%，脂肪1.3%~1.8%，并含有丰富的B族维生素等。大米蛋白中的谷蛋白和球蛋白为主要成分，分别占8%和12%，醇溶蛋白占3%，大米蛋白主要以PB-Ⅰ和PB-Ⅱ两种蛋白体的形式存在。在我国，有大量的陈米、早籼米和碎米，有一部分用于发酵和淀粉糖工业，然后就会留下米渣，大米经制糖后，由于大量的淀粉已经被利用，其中蛋白质得到浓缩，蛋白质含量高达40%~60%；还有一部分直接当做饲料来喂养牲畜。这样没有达到物尽其用的效果，造成资源的浪费。因而，对大米蛋白的深加工不仅使大米物尽其用，避免资源浪费，而且还能提高大米蛋白经济价值。 1.2 大米免疫活性肽分离纯化技术的研究对于活性肽规模化的工业化生产具有重要意义 生物活性肽是对生物机体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物，是一类相对分子质量小于6000 Da，具有多种生物学功能的多肽，多肽现在主要应用在药物和功能性食品上。大米蛋白作为一种低过敏性的优质植物蛋白，其中蕴涵着许多具有生物活性的氨基酸序列，用特异的蛋白酶水解就有可能释放出有活性的肽段。 目前，虽然已经发现大米活性肽具有许多生理活性特征，如抗氧化性、ACE抑制活性和免疫活性等，但对其实际应用开发仍处于摸索阶段，对大米活性肽功能效应的研究开发也以实验室阶段为主，尚未形成大规模的工业化生产。对大米肽的研究主要集中在抗氧化肽和ACE抑制肽，而对免疫活性肽的研究比较少，而且酶法制备免疫活性肽的分离纯化还到很多问题的困扰，酶法制备免疫活性肽的过程中产生了大量分子量相近的肽段，还缺乏高效的普适性分离纯化免疫活性肽的方法。 另外随着我国人口的老龄化，老年人口比例已占总人口的14.5%，随着年龄增长，机体免疫力下降，刚出生的婴儿，其免疫器官尚未发育完全，免疫系统的功能也不健全，他们对免疫力的提高有非常必要需求，大米免疫活性肽的开发有潜在的市场需求。 针对上述问题，本项目从优化酶法制备大米免疫活性肽的工艺和摸索高效的普适性的分离纯化大米免疫活性肽的工艺方法，以期得到最佳酶解大米免疫活性肽的工艺和高效的普适性的分离纯化大米免疫活性肽的方法，为大米免疫活性肽的工业化生产提供最佳工艺条件，使大米免疫活性肽更广泛、科学地应用于食品工业及医药领域。开发具有免疫活性的大米肽，以丰富功能性食品市场，同时大米免疫活性肽也可用来开发免疫增强剂，丰富医药市场，这样不但提高资源利用率，也将为我国的健康事业和经济发展做出贡献。 2. 国内外研究现状分析和发展趋势 随着具有各种生物活性的多肽的不断发现，对多肽的研究和开发越来越受到各国科学家的重视。近十多年来，国内外对多肽进行了大量的基础和应用研究，国外早已将多肽药物和营养产品推向市场，且市场前景极为可观。Yoshiyuki 等[1]可以从酒糟中分离出九种具有ACE抑制活性的肽；刘志国等[2]分别用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶单独或联合水解米糠蛋白，酶解组分中含有较高ACE抑制活性成分，其相对分子量在500 u以内，其中活性组分主要为 Arg-Tyr、Met-Trp、Gly-Val-Tyr 或 Gly-Asp-Phe，这些组分共同特征C端具有苯环样结构；蒋燕等[3]采用不同的蛋白酶对碎米蛋白进行水解，得出最佳水解酶为风味蛋白酶，同时确定出的最佳酶解工艺条件下ACE抑制肽的抑制率可达85.4%;Takahashi 等[4]报道用胰蛋白酶