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核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1999年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 第一节 核酸的化学组成 碱基(base) 核苷(nucleoside) * DNA的功能 作为生物遗传信息复制的模板和基因转录的模板,是生命遗传的物质基础,也是个体生命活动的基础。 稀有碱基 一、核酸的一般理化性质 DNA线性高分子,粘度极大。 DNA容易断裂 OD260=1.0:相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA(或RNA)。 20μg/ml寡核苷酸 根据260nm与280nm的光密度比值判断核酸样品的纯度。 纯品DNA OD260/ OD280=1.8 纯品RNA OD260/ OD280=2.0 热变性 解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。 (三)DNA在真核生物细胞核内的组装 ◆染色质的基本组成单位——核小体,由DNA和组蛋白 共同构成。 ◆核心组蛋白/核心颗粒/核小体 核小体串珠样的结构 DNA双螺旋 ↓ 核小体 ↓ 串珠状多核小体 ↓ 螺线管 ↓ 超螺线管 ↓ 染色单体 基因(gene)从结构上定义, 是指DNA分子中的特定区段, 其中的核苷酸排列顺序决定 了基因的功能。 结构基因 指编码蛋白质或RNA 的DNA序列。 基因组(genome)指细胞或生物体中,一套完整的单倍体遗传物质的总和。如人类基因组包含22条染色体和X或Y两条性染色体上的全部遗传物质(核基因组),以及胞浆线粒体上的遗传物质(线粒体基因组)。 RNA的一般结构特征 主要存在于细胞质中。 单链分子,碱基组成不遵守Chargaff规则。 与DNA在碱基组成上的区别是RNA分子中含有U。 RNA核糖分子上C2’-OH是游离的。 第三节 RNA的结构和功能 RNA的种类、分布、功能 催化性的小RNA 小片段干扰RNA siRNA 非mRNA 小RNA (snmRNA) 一、mRNA的结构与功能 细胞内含量较少的一类RNA,但种类很多。 功能:转录核内DNA遗传信息的碱基排列顺序。并携带到胞质,指导蛋白质合成的氨基酸排列顺序。 三联密码:mRNA分子上每三个核苷酸为一组,决定肽链上的一个氨基酸。 真核生物mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸也可甲基化,形成帽子结构:m7GpppNm-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构,称为多聚A尾。每10-20bp结合一个PABP(poly A结合蛋白)。 帽子结构 m7GpppNm- 7-甲基鸟苷 二磷酸基 5 5 polyA mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 * mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 二、转运tRNA的结构与功能 细胞内分子量最小的一类核酸 含稀有碱基 细胞内tRNA的种类很多 二级结构为“三叶草”的结构。 三级结构呈倒L形。 重要的功能是参与转运氨基酸,解译mRNA的密码。 可作为反转录的引物。 假尿嘧啶核苷 次黄嘌呤核苷 二氢尿嘧啶核苷 甲基鸟嘌呤核苷 5 1 7 NH2 tRNA的二级结构 反密码环---反密码子 氨基酸臂---CCA-OH 功能部位: tRNA 三级结构 倒L形 tRNA的3?-末端都是以CCA结尾。 3?-末端的A与氨基酸共价连结,tRNA成为了氨基酸的载体。 不同的tRNA可以结合不同的氨基酸。 (三)tRNA的3?-末端连接氨基酸 tRNA的反密码子环上有一个由三个核苷酸构成的反密码子(anticodon)。 tRNA上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。 (四)tRNA的反密
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