第三章紫外及可见吸收光谱法02.ppt

3-6 光度测量误差 一、仪器测量误差 1 测量误差的来源 　　　光源的不稳、检测器不灵敏和光电流测量不准确等等，在仪器透光率读数尺上表现为读数误差?T． 　　　对于同一台光度仪器，?T基本上为一常数，一般为±0.01～±0.002．该读数误差是限制光度分析准确度的主要原因． ２透光率与浓度测量误差 T~c之间关系为对数性质，同样， ?T对不同浓度的溶液造成的?c不同． 当被测物质浓度很小时，由?T造成的?c也很小，但由于浓度c本身很小，相对误差?c/c仍然较大． 当被测物质的浓度很大时，由?T 造成的?c很大，所以相对误差?c/c也较大． 　　只有当被测物质浓度c在适当范围时，即透光率T（或吸光度A）在适当范围时，仪器的测量误差所引起的结果的相对误差才比较小． 依比尔定律 　 A=-lgT=abc　 将上式写成自然对数并微分 浓度测量误差不仅与仪器的绝对误差有关，而且还与它本身的透光率有关． 要使?c/c最小，TInT应最大，即： T=15~65%(A=0.2~0.8)范围内，浓度测量的相对误差较小． A过大或过小，误差非常大，不适于高含量或较低含量组分的测定． 为了控制合适的读数范围，宜采取的方法有： 1)控制溶液的浓度； 2)选择不同厚度的吸收池． 二、测量条件的选择 １辐射波长和狭缝宽度的选择 　　 根据吸收曲线，选择溶液具有最大吸收时的波长为宜． 　　 应选择ε值随波长改变而变化不太大的区域的波长． 狭缝宽度 狭缝的宽度直接影响到测定的灵敏度和标准曲线的线性范围．狭缝宽度增大，入射光的单色性降低，在一定程度上使灵敏度下降，标准曲线偏离比尔定律． 狭缝的宽度以减小狭缝宽度时，试样的吸光度不再增加为止．一般情况下，狭缝宽度约是吸收峰半宽度的1/10． 2 控制适当的吸光度范围 控制标准溶液和被测溶液的吸光度在0.2～0.8范围内．（定量分析） 可以从控制溶液浓度和选择不同厚度的吸收池来考虑． 3 控制影响溶液吸收光谱的变量 影响一种溶液吸收光谱的常见变量有溶液的酸度、温度、高电解质浓度、溶剂的性质和存在的干扰物质等． 4 选择适当的参比溶液 总原则： 试液的吸光度真正反映待测物的浓度． 测量吸光度时，利用参比溶液来调节仪器的零点，消除吸收池器壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差． 　 A=lgI0/I=I参比／I试液 选择参比溶液的原则 仅待测物与显色剂的反应产物有吸收，可用纯溶剂作参比溶液． 若显色剂或其它试剂略有吸收，应用空白溶液（不加试样）作参比． 试样中其它组份有吸收，但不与显色剂反应，则当显色剂无吸收时，选用试样溶液作参比溶液（不加显色剂）；当显色剂略有吸收时，在试样中加入适当掩蔽剂，再加显色剂，以此溶液作参比溶液． 三、显色反应及显色条件的选择 显色反应：将待测组份转变成有色化合物的反应 显色剂：与待测组份形成有色化合物的试剂 选择合适的显色反应，严格控制反应条件 (一)显色反应的选择 1 灵敏度足够高 2 选择性好，干扰少，或干扰易消除 3 显色剂在测定波长处无明显吸收 4 反应生成的有色化合物组成恒定，化 学性质稳定 (二)显色条件的选择 吸光光度法是测定显色反应达到平衡时溶液的吸光度，因此要能得到准确的结果，必须从研究平衡着手，了解影响显色反应的因素，控制适当的条件，使显色反应充全和稳定． 1 显色剂用量 显色反应从一般可用下式表示： M 　　十　　 nR 　＝ 　MRn (待测组分)　　(显色剂) (有色化合物) 根据溶液平衡原理，有色络合物稳定常数愈大，显色剂过量愈多，愈有利于待测组分形成有色络合物． 但是过量显色剂的加入，有时会引起副反应的发生，对测定反而不利． 其方法是将待测组分的浓度及其它条件固定，然后加入不同量的显色剂，测定其吸光度，绘制吸光度(A)浓度(c)关系曲线，一般可得到下图所示三种不同的情况： 图(b)中曲线，如硫氰酸盐作显色剂测定钼的反应，要求形成红色的Mo(SCN)5进行测定． Mo(SCN)3-　　　 Mo(SCN)5　　　 Mo(SCN)6- 　　 浅红　　 　　橙红　　　　　 浅红　 　　　显色剂SCN-浓度太低或太高，生成配位体数低或高的络合物，吸光度都降低． 　　 图(c)中曲线表明，随显色剂浓度增大，吸光度不断增大，例如SCN-与Fe3+离子反应，生成逐级络合物Fe(SCN)n3-n， n＝1，2，…，6． 2　酸度 a)影响显色剂的平衡浓度和颜色 由于大多数有机显色剂是有机弱酸，在溶液中存在着下列平衡：　 M + HR ＝MR +