第六章微生物的遗传与育种食.ppt

具体转化过程如下： 先从供体菌提取DNA片段，接着DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合，在结合位点上，DNA片段中的一条单链逐步降解为核苷酸和无机磷酸而解体，另一条链进入受体细胞，这是一个消耗能量的过程； （一）转化（transformation） 进入受体细胞的DNA单链与受体菌染色体组上同源区段配对，而受体菌染色体组的相应单链片段被切除，并被进入受体细胞的单链DNA所取代，随后修复合成，连接成部分杂合双链； 然后受体菌染色体进行复制，其中杂合区段被分离成2个，一个类似供体菌，另一个类似受体菌； 当细胞分裂时，此染色体发生分离，形成一个转化子； 具体转化过程如下： （一）转化（transformation） 影响转化效率的因素： 受体细胞的感受态，它决定转化因子能否被吸收进入受体细胞； 受体细胞的限制酶系统和其他核酸酶，它们决定转化因子在整合前是否被分解； 受体和供体染色体的同源性，它决定转化因子的整合； （一）转化（transformation） （二）转导(transduction) 通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA小片段携带到受体细胞中，通过交换和整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。获得新遗传性状的受体细胞，就称转导子。 细菌转导的二种类型 普遍性转导 局限性转导 1、普遍性转导 通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何DNA小片段的“误包”，而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象，称为普遍性转导。 转导噬菌体为什么“错”将宿主的DNA包裹进去? 噬菌体的DNA包装酶酶也能识别染色体DNA上类似pac的位点并进行切割，以“headful”的包装机制包装进P22噬菌体外壳，形成只含宿主DNA的转导噬菌体颗粒（假噬菌体）。 因为染色体上的pac与P22 DNA的pac序列不完全相同，利用效率较低，这种“错装”机率一般仅约10-6-10-8。 1、普遍性转导 形成转导颗粒的噬菌体可以是温和的也可以是烈性的，但必须具有能偶尔识别宿主DNA的包装机制并在宿主基因组完全降解以前进行包装。 普遍性转导的基本要求： 1、普遍性转导 普遍性转导的三种后果： 进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换而形成稳定的转导子。 流产转导（abortive transduction） 转导DNA不能进行重组和复制，但其 携带的基因可经过转录而得到表达。 特点：在选择培养基平板上形成微小菌落 外源DNA被降解，转导失败。 DNA不能复制，因此群体中仅一个细胞含有DNA， 而其它细胞只能得到其基因产物，形成微小菌落。 普遍性转导的三种后果： （1）完全普遍转导 通过重组，供体基因整合到受体细胞的染色体上，从而使受体细胞获得供体菌的遗传性状，产生变异，形成稳定的转导子，这种转导称为完全普遍转导。 （2）流产普遍转导 在普遍性转导中，有时转导来的供体DNA不一定都能整合到受体染色体上，产生稳定转导子，更多的则是转导来的供体染色体不能整合到受体染色体，也不能复制，但可以表达，这种转导称为流产转导。 1、普遍性转导 普遍性转导又可分为完全普遍转导和流产普遍转导。 2、局限性转导（specialized transduction） 指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并获得表达的转导现象。 特点： 只能转导供体菌的个别特定基因； 该特定基因由部分缺陷的噬菌体携带； 缺陷噬菌体是由于其在形成过程中所发生的低频率“误切”，或由于双重溶原菌的裂解而形成，而后一情况下可以形成50%缺陷噬菌体； 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点上宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时， 在前噬菌体二侧的少数宿主 基因因偶尔发生的不正常切 割而连在噬菌体DNA上。 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 2、局限性转导（specialized transduction） 缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装，提供所需要的裂解功能，形成转导颗粒； 但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力，感染受体细胞后，通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的转导子； 2、局限性转导（specialized transduction） 温和噬菌体λ裂解时的不正常切割：包含gal或bio基因（几率一般仅有10-6） 局限性转导与普遍性转导的主要区别： a）被转导的基因共价地与噬菌体DNA连接，与噬菌体DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞中。而普遍性转导包装的可能全部是宿主菌的基因。 b）局限性转导颗粒携带特定的染色体片段并将固定的个别基因导入受体，故称为局限性转导。而普遍性转导携带的宿主基因具有随机性。 2、局限性转导（specialized transduction