【2017年整理】毕赤酵母蚓激酶重组体的高密度发酵与活性.docxVIP

毕赤酵母蚓激酶重组体的高密度发酵与活性 摘要 一种用于重组蚓激酶（rPI239）的表达系统在巴斯德毕赤酵母的发展。通过1L高密度发酵肉汤制得0.174g上清蛋白。rPI239体外表现出纤溶活性。在体内rPI239的活性是通过凝血酶原时间，高岭土部分凝血酶时间，凝血酶时间和纤溶活性测定。这项工作显示通过巴斯德毕赤酵母和高密度发酵得到的rPI239重组蛋白在体内和体外都具有相似纤溶活性。 关键词 蚓激酶；纤维蛋白溶解；毕赤酵母；发酵；活性 传统中医学已经长期使用蚯蚓作为药物，因为它们的抗发热和利尿特性。最近研究表明，在蚯蚓干燥粉末含有纤溶酶组分。研究人员在日本，韩国和中国已经分离和研究蚯蚓中获得的蚓激酶。目前的数据显示，在地龙F-Ⅲ-1和F-Ⅲ-2发现的6种同工酶。1986年，Wu等人，从蚯蚓中分离出的一组蚓激酶组件并且证实他们有激活纤溶酶原的纤溶活性和降解纤维蛋白，而EFE-II证实是纤溶活性蚓激酶的基因。该作者通过用I125标记患有肺血管阻塞症兔子血管中的内栓子并且显示口服药物EFE-II后有明显纤溶活性。同工酶（PDBank1IJ7）通过晶体结构分析MIR（多同晶置换）表明它是一个特效弹性蛋白酶S1反应区，表现广泛的底物活性。最近的研究已经表明蚓激酶是有潜力的溶栓药。1999年，Sun等人，从地龙中单独分离出蚓激酶PI239，在纤维蛋白板上发现明显纤溶活性。它的cDNA文库与F