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- 2017-01-17 发布于浙江
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【2017年整理】病理科免疫组化技术员培训
病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范
一、病理科免疫组织化学技术员培训规范:
凡新入我科的病理技术员均需进行免疫组化理论知识的学习、培训,经考核合格、具备病理技术员技士资质后方能从事免疫组织化学染色。
二、病理科免疫组织化学染色操作规范
1.免疫组织化学染色前的准备事项
(一)组织切片的制备
常规切片脱蜡至水(组织固定需用10%中性甲醛)
(二)抗体的选择、稀释和保存
(1)选择抗体应先了解其反应谱和适用条件〔包括适用切片(石蜡切片抑或冷冻切片)、稀释度和温育时间等〕。
(2)对于未曾使用过的新抗体,应按照有关说明书的提示,以几个不同的稀释度对适宜检材(已知阳性切片/涂片)进行预试验;根据染色阳性表达的程度和检材背景着色程度,确定用于染色的最适稀释度
(3)抗体的原液应于分装后置于一20℃冷室中保存,切勿反复冻存(以免效价 降低)。
(4)抗体的工作液可置于4℃冰箱中保存。
(5)抗体的稀释。
(1)一般用0.01M PBS(生理盐水磷酸盐缓冲液),pH值7.2。
(2)或用0.05M TBS(生理盐水三经基氨基甲烷缓冲液),pH值7.6。
(3)必要时可按需要加适量小牛血清清蛋白。
(三)被检测组织内抗原的修复
(1)经4%中性甲醛之类含醛基固定剂固定的组织,其切片中的抗原决定簇因醛的交联作用而被封闭,从而影响抗原一抗体反应。进行免疫组织化学
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