藥敏试验方法及药敏试纸的选择.docVIP

（信息来源：/） 药敏试验方法及药敏试纸的选择 关键字： 青霉素 葡萄球菌 头孢噻肟 球菌 内酰胺酶 链球菌 耐药 肺炎链球菌 肠杆菌科内酰胺类 摘要：头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB）奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ）亚安培南 头孢匹肟（FEP） 头孢克罗（CEC）2、铜绿假单孢菌/不动杆菌妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT）头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ）左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南 哌拉西林/三唑巴坦3、金黄色葡萄球菌苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（ K-B法：　　1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。　　2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤出过多的菌液。　　3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。　　4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。　　5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。　　6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。　　说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K-B法.　　肺炎链球菌胶乳凝集测定法　　1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。　　2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidex pneumo-kit)于室温。　　3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。　　4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。　　5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。　　注：R3为阳性对照。　　药敏纸片的选择　　1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科）　　头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ）　　氨苄西林（AM） 哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN）　　头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM）　　庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA）　　头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB）　　奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ）　　亚安培南 头孢匹肟（FEP） 头孢克罗（CEC）　　2、铜绿假单孢菌/不动杆菌　　妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT）　　头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟　　头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ）　　左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南 哌拉西林/三唑巴坦　　3、金黄色葡萄球菌　　苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN）　　红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）　　万古霉素 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦　　头孢噻吩（CF）　　4 、肠球菌　　氨苄西林（AM）万古霉素 环丙沙星（CIP）　　庆大霉素（GM）红霉素（E） 氧氟沙星（OFL）　　5、除肺炎链球菌外链球菌　　氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素　　红霉素（E） 氧氟沙星（OFL）克林霉素(CM)　　肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌和大肠杆菌ESBLs的检测　　MH培养基上贴头孢他定，头孢他定/克拉维酸，头孢噻肟/棒酸，安曲南。　　如头孢他定的抑菌圈22mm，安曲南27mm，头孢噻肟27mm，意味可能有ESBLS产生。　　如头孢他定/克拉维酸与头孢他定，头孢噻肟/棒酸与头孢噻肟的差值≥5mm，则确证ESBLS产生。　　耐药机制。　　一代头孢对普通变形杆菌、枸橼酸杆菌、肠球菌、假单孢菌属、沙雷氏菌属、拟杆菌属无效。第二代头孢对假单孢菌属、不动杆菌属、沙雷氏菌属、肠球菌无效；肠球菌对头孢类天然耐药。氨基糖甙类抗生素阿米卡星与庆大霉素不完全交叉耐药。红霉素类、四环素类等抗生素内部有相互交叉耐药。　　金黄色葡萄球菌耐万古霉素、无乳链球菌耐青霉素和氨苄青霉素、无乳链球菌和D群链球菌耐万古霉素和替拉考宁为不可能的表型。　　洋葱伯克霍德菌对氨基糖甙类、亚安培南天然耐药。　　除表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌外，替拉考宁耐药的凝固酶阴性的葡萄球菌不常见。　　金黄色葡萄球菌对复方新诺明耐药为罕见表型。　　氨苄青霉素对