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藥物代谢动力学实验讲义
实验一 药酶诱导剂及抑制剂对
戊巴比妥钠催眠作用的影响
【目的】
以戊巴比妥钠催眠时间作为肝药酶体内活性指标,观察苯巴比妥及氯霉素对戊巴比妥钠催眠作用的影响,从而了解它们对肝药酶的诱导及抑制作用。
【原理】
苯巴比妥为肝药酶诱导剂,可诱导肝药酶活性,使戊巴比妥钠在肝微粒体的氧化代谢加速,药物浓度降低,表现为戊巴比妥钠药理作用减弱,即催眠潜伏期延长,睡眠持续时间缩短。而氯霉素则为肝药酶抑制剂,能抑制肝药酶活性,导致戊巴比妥钠药理作用增强,即催眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长。
【动物】
小白鼠8只,18~22g
【药品】
生理盐水、0.75%苯巴比妥钠溶液、0.5%氯霉素溶液、0.5%戊巴比妥钠溶液
【器材】
天平、鼠笼、秒表、注射器1 ml×4、5号针头×4
【方法与步骤】
一、药酶诱导剂对药物作用的影响
1、取小鼠4只,随机分为甲、乙两组。甲组小鼠腹腔注射0.75%苯巴比妥钠溶液0.1 ml/10g,乙组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g,每天1次,共2天。
2、于第三天,给各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1 ml/10g,观察给药后小鼠的反应。记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间,计算戊巴比妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
二、药酶抑制剂对药物作用的影响
1、取小鼠4只,随机分为甲、乙两组。甲组小鼠腹腔注射0.5%氯霉素溶液0.1 ml/10g;乙组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g。
2、30分钟后,给各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1 ml/10g,观察给药后小鼠的反应。记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间,计算戊巴比妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
【统计与处理】
以全班结果(睡眠持续时间,分)作分组t检验,检验用药组与对照组有无显著性差异。(参见“数理统计在药理学实验中的应用”)
【注意事项】
1、催眠潜伏期为开始给药到动物翻正反射消失的间隔时间,睡眠持续时间为翻正反射消失至恢复的间隔时间。
2、本实验过程中,室温不宜低于20°C,否则戊巴比妥钠代谢减慢,使动物不易苏醒。
3、氯霉素溶液有结晶析出时可在水浴中加热溶解。
4、吸取氯霉素溶液的注射器应预先干燥,否则易结晶堵塞针头。
【思考题】
1、何谓肝药酶诱导剂与抑制剂?
2、试从理论上解释苯巴比妥及氯霉素对戊巴比妥钠睡眠时间的影响。
实验二 家兔血浆中水杨酸钠
浓度测定和药代动力学参数测定
【实验目的】
1. 以水杨酸钠为例了解血浆药物浓度随时间变化的时量关系。
2. 了解药代动力学参数的临床意义。
【实验材料】
动物:家兔1只,雌雄不限,体重(2.5+0.5)kg。
器材:试管5支、离心管3支、试管架、小玻棒、l0ml吸管、注射器(1 ml、5ml、l0ml)、手术器械、动脉插管、动脉夹、721分光光度计、离心机
试剂和药品:25%氨基甲酸乙酯、10%及0.02%水杨酸钠溶液、10%三氯醋酸溶液、10%三氯化铁溶液。
【实验步骤】
1.实验准备:
取离心管3支及试管5支,编号备用,麻醉(乌拉坦4ml/Kg),1~3号离心管及4、5号试管中分别加入10%三氯醋酸7ml
2.手术:
颈动脉取血2ml,放入1号离心管
3.给药:
耳缘静脉注入10%水杨酸钠,150mg/Kg,取血(5,35min分别取血2ml放入2、3号离心管,4、5试管分别加入蒸馏水及0.02%水杨酸钠2ml)
4.离心:
2000r/分,5min,取上清液6ml,加入10%三氯化铁(12滴),比色(5min后,波长510nm),计算结果。
【注意事项】
1.注意颈总动脉插管术。
2.取血时,要先用0.1%肝素润湿注射器和针头,取血后用肝素封管,避免血液凝固,每次取出血第1ml弃去不用,再吸取2ml置于离心管内。
3.给药时间及给药后取血时间要记清。
4.取上清夜时,要先将上清液倒入编号相对应的试管中,再吸取所需的ml数,以免吸入沉淀影响比色,注意吸管要对号使用。
5.计算Vd, CL时注意单位换算。
【实验结果】
管号 光密度(X) 水杨酸钠浓度(Y)g/100ml
标准管(5号) X 0.02
给药后5min(2号) X1 C1
给药后35min(3号) X2 C2
计算:
半衰期(t1/2):
K=y/x
C1=kx1,C2=k
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