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三种梅毒血清学试验方法检测梅毒螺旋体的结果对比分析.doc
三种梅毒血清学试验方法检测梅毒螺旋体的结果对比分析
摘要:目的 观察三种梅毒血清检验方法对梅毒的检出效果。方法 收集60例梅毒患者血清标本,将其随机分为三组,A组、B组、C组,各20例。A组选择酶联免疫吸附试验(ELISA)检验法;B组选择甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)进行检验;C组选择梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行检验,分析比较三组标本的检出结果。结果 C组阳性检出率最高为100%,明显高于A组的85.0%与B组的90.0%。结论 TPPA的特异性与敏感性均高于另两种检验法,适用于检测疑似阳性标本,但三种方法各有优劣,应根据具体情况选择合适的检测方法。
关键词:梅毒;ELISA;TRUST;TPPA;检验效果
梅毒是一种最为严重的性传播疾病,梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)是主要的致病原因。TP会侵犯皮肤黏膜及相关神经、心血管、骨骼等重要组织器官,进而造成慢性病变,严重影响到患者的健康[1]。目前,主要依靠实验室检查结果对梅毒进行筛查与确诊。为合理选择检测方法,本次研究对ELISA、TRUST、TPPA三种检测方式进行对比研究,现将情况报告如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 从2012年6月~2014年12月本院发现的梅毒患者中选取60例,均满足梅毒检验标准GB15974而确诊。其中,男27例,女33例;年龄在25~53岁,平均年龄为(35.2±2.4)岁。将患者随机分为三组,A组、B组、C组,每组20例。比较分析三组的一般资料,发现差异不大(P0.05),可进行比较。
1.2方法
1.2.1试剂来源 TRUST试剂为上海荣盛生物技术有限公司生产,ELISA试剂由上海科华生物工程股份有限公司生产,TPPA试剂则是日本富士瑞比欧株式会社生产的产品。上述试剂均通过卫生部部门的批检,确认合格后使用。
1.2.2检验方法 ①A组:本组血清标本严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作;②B组:本组采用TRUST试验进行检测,方法是把VDRL抗原与含有特制的甲苯胺红溶液相混合,观察是否出现由痛血清反应素引起的凝集块;③C组:采用TPPA试验进行检测,方法是在室温条件下,在U型板上利用稀释液将血清稀释,并分别加入致敏与未致敏明胶颗粒,再孵育2h后确认结果。
1.3统计学方法 对试验数据运用SPSS16.0统计学软件进行分析,并利用χ2检验相关计量资料。当P0.05时,表示差异存在统计学意义。
2 结果
2.1对比梅毒检验结果 A组检出17例,阳性率为85.0%;B组检出18例,阳性率为90.0%;C组检出20例,阳性率为100%。由此可见,TPPA对梅毒的阳性检出率明显高于TRUST与ELISA,差异显著,存在统计学意义(P0.05)。
2.2对比三种方法的敏感性与特异性 TPPA的特异性与敏感性分别是98.3%、98.9%;而TRUST的特异性与敏感性均较低,分别为88.2%、85.6%;ELISA的特异性与敏感性位于二者之间,分别为95.3%、96.4%。因此,TPPA和另两种检测法在特异性与敏感性方面存在明显差异,具有一定的统计学意义(P0.05)。
3 讨论
近年来我国梅毒发病率有明显的升高趋势,究其原因可能与城市流动人口增多、性行为观念的转变以及血液制品的大量使用有关。梅毒的常见传播途径包括性传播与血液传播,也可通过哺乳、输血、接吻、意外伤害等途径染病。梅毒螺旋体(TP)是引发该病的主要致病原因。当TP侵入人体后,人体会产生特异抗螺旋体类抗体(TP-Ab)与一些非特异的抗类脂质性抗体。特异性梅毒螺旋体抗体主要有IgM与IgG两种,一般在感染TP后3~6周后出现[1]。IgM抗体会伴随着疾病的发展而逐渐消失,但IgG抗体会长时间留在体内,甚至终生存在。医学界也把TP-Ab作为诊断梅毒的主要检测手段,目前,临床上诊断梅毒的血清学检验方法种类较多,各有优劣,下面主要介绍临床上常用的三种检测方法。
3.1 ELISA梅毒血清学检测方法 伴随着血液检测技术的发展,形成了很多新的血清学检测方法,包括ELISA。该检测方法是在微孔板上包被梅毒螺旋体抗原,采用双抗原夹心法,从而提升了对TP的特异性与敏感性。据相关研究显示,TPPA与ELISA在敏感性与特异性方面都比较相似,均具有较好的敏感性与特异性。由于ELISA检测法能同时检测到IgG与IgM等特异性抗体,但随着有效的治疗后,IgG抗体仍可能被检出,个别患者甚至终生都可检出。因此,ELISA检测法不能作为评定患者临床治疗效果与病情复发及再次感染的依据。此外,特异性梅毒血清学试验存在一定的局限性,可能会受到一些生理或病理方面的影响,导致假阳性率。一些老
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