免疫学检验与临床-刘斌总结.ppt

优点: 灵敏度高（高于单扩法5-10倍），稳定性好（CV﹤10%），操作简便，结果准确 不足: ①抗体用量较大； ②溶液中的抗原-抗体复合物分子应足够大，分子太小阻挡不了光线的通过；数量要足够多，否则溶液浊度变化太小，对光通量影响不大；对光度计的灵敏度要求高，这样微小的浊度变化能引起透光率改变，因此通常要加增敏剂。灵敏度较散射比浊法低。 ③增敏剂自凝出现非特异性凝集。 HAV感染标志物出现时间 HAV感染检测标志物 HAV-IgM： 一周内阳性占45% 1～2周内出现阳性35% 2～4周内出现阳性10% 可用于甲型肝炎的明确诊断 HAV- IgA 分泌型抗体 HAV- IgG 出现较晚，几乎终身存在，阳性说明曾有过感染，保护性抗体 HAV-Ag 急性感染发病前1～15 天，粪中阳性率为70%～ 85%，发病 一 周可降为一半左右，发病半个月后很难检测到是特异性诊断指标 HAV-RNA 病毒存在的指标 乙肝“三对” 乙肝表面抗原(HBsAg)：最早出现在血液中的病毒抗原 乙肝表面抗体（抗HBs ）：中和或保护抗体 乙肝e抗原（HBeAg）：第二个出现在血液中的病毒抗原 乙肝e抗体（抗HBe） 乙肝核心抗体（抗HBc）：最早出现在血液中的抗体（IgM） 乙肝核心抗体（抗HBc）： IgG HBsAg HBsAg是S基因编码的一个蛋白，容易发生变异。 HBsAg有一个特异的共同抗原决定簇“a”和至少两个亚型决定簇“dy”和“wr” 血清型为adw、adr和ayw 我国绝大多数地区以adr为主, adw次之，新疆、西藏、内蒙古自治区的本地民族几乎全为ayw。 HBsAg：ELISA方法检测下限可达0·15ng/ml 假阴性的可能因素： 1、HBsAg含量低于所用方法的测定下限之下 2、编码HBsAg的HBV S基因的突变 3、丙肝与丁肝重叠感染对HBsAg复制和表达的抑制作用 4、试剂所用抗体对HBV不同基因型检测敏感性的不同 HBsAg的变异可致不常见的血清学标志物模式 (1)单独HBcAb阳性 (2)HBsAg阴性但HBeAg阳性 (3)HBsAg阴性但HBcAb和HBsAb阳性 (4)HBsAg(HBeAg)和HBsAb(大多为100 IU/ml 的低滴度)同时存在 (5)使用不同厂家的试剂盒得到的结果不一致 HCV 感染后血液中指标的出现 抗-HCV 检测和结果报告程序 丁型肝炎病毒（Hepatitis D Virus) HDV是一种缺陷病毒必需依赖HBV等嗜肝DNA病毒为其提供外壳，才能进行复制。 传播方式：血源传播 感染方式：共同感染——预后良好 重叠感染—— 1、自限性丁型肝炎 2、慢性进行性丁型肝炎 3、HDV与重型肝炎  化学发光免疫分析? 化学发光物标记的化学发光免疫分析是一种用化学发光物直接标记抗体或抗原，测定反应后抗原抗体复合物上的发光强度来了解抗原或抗原浓度的一类免疫分析法（故称直接化学发光法）。该方法结合了化学发光技术和磁性微粒子分离技术，以细小的顺磁性微粒为固相载体。其测定原理与双抗体夹心法、双抗原夹心法和竞争结合法等相同。 甲功检测 甲功检测 梅毒血清试验假阳性因素： 技术性： 标本的污染 溶血 操作失误 生物学假阳性： 某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发展过程中释放心磷脂到血液中假阳性。 生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性。 急性期 HIV RNA Anti-Ag 潜伏期 Anti-Ab 艾滋病期 Anti-gp41/120 (anti-gp36) Anti-P24 感染 1周 2周 3周 4周………………….1年 2年 3年…………….10年……….. 浓度 窗口期 代次 抗原 方法 检测时间 1 全病毒 间接 2个月 2 重组或多肽 间接 3-4 周 3 重组+多肽 夹心 2-3 周 4 抗原+抗体 夹心 2周左右 HIV抗体试剂盒进展 发光 Y Y Y 磁微粒 被测抗原