检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质概述.ppt

检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质 阅读书本18页，填一填 糖类中的还原糖与_______发生作用，生成______。 脂肪可以被________染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成_____）。 淀粉遇___变成蓝色。 蛋白质与_______发生作用，产生______。 紫色反应 双缩脲试剂 碘 红色 苏丹Ⅲ染液 砖红色沉淀 斐林试剂 实验思路 斐林试剂 水浴加热 （50—65℃） 还原糖 （葡萄糖、果糖、麦芽糖） 生产砖红色沉淀 还原糖与斐林试剂反应，形成砖红色沉淀 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染液染成红色。 脂肪颗粒 苏丹Ⅳ 橘黄色的脂肪颗粒 显微镜观察 脂肪颗粒 苏丹Ⅲ 显微镜观察 红色的脂肪颗粒 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。 蛋白质 加入双缩脲试剂 产生紫色反应 1、还原糖的检测： 取2ml待测组织样液 加入1ml斐林试剂 砖红色沉淀 50—65 ℃水浴加热 2 min 颜色变化： 砖红色沉淀 (Cu2O) 蓝色沉淀 (Cu(OH)2) 注意：斐林试剂要现配现用，要将甲液和乙液等量混合 甲液：0.1 g/ml 的NaOH 乙液：0.05 g/ml 的 CuSO4 斐林试剂： 2、脂肪的检测 选材 切片 制片 镜检 现象：可看到圆形小颗粒呈橘黄色（或红色） 染色 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 去浮色 50%的酒精 制片 滴蒸馏水，盖上玻片 3、蛋白质的检测 加入双缩脲试剂 紫色溶液 注意：双缩脲试剂应先加1ml NaOH，再加4滴CuSO4 取样液2ml加入试管 振荡 颜色变化: 紫色溶液 蓝色溶液 双缩脲试剂： A液：0.1 g/ml 的NaOH B液： 0.01g/ml 的 CuSO4 实验的几个细节 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖 非还原糖:蔗糖 还原糖：糖类中含有还原性的糖，还原性的糖内含有—CHO（醛基） 糖类的检测注意事项 选择颜色较浅或近白色的组织材料。 斐林试剂要现配现用,等量混合。 斐林试剂 双缩脲试剂 CuSO4溶液浓度 0.05 g/ml 的 CuSO4 0.01 g/ml 的 CuSO4 使用方法 NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合后立即使用 先加入NaOH溶液1ml，再加入CuSO4溶液4滴 斐林试剂与双缩脲试剂的区别 习题 （1）鉴定成熟苹果肉中存在还原性糖所用的试剂是___，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成________沉淀。 （2）鉴定花生子叶细胞中脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染液是_________，用其染色时，要用_____来冲洗浮色 （3）斐林试剂极不稳定，需_______，使用时其甲液和乙液再临时混合均匀用于实验。 （4）双缩脲试剂的使用，应先加试剂_________，提供碱性环境，再加试剂______。 斐林试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ 现配现用 NaOH溶液 CuSO4溶液 50%酒精溶液 习题 (5)现提供新配置的斐林试剂甲液(0.1g/mlNaOH溶液) 、乙液(0.05g/mlCuSO4溶液) 、蒸馏水，充分利用上述试剂及必需的实验用具，能鉴定下面哪种物质 ①葡萄糖 ②蔗糖 ③胰蛋白酶 ④DNA( ) A.只有① B.①和② C.①和③ D.②、③和④ 习题 (6)鉴定糖类、脂质、蛋白质试验中不会用到的仪器或操作是(　　) A.显微镜 B.离心机 C.水浴加热 D.震荡摇匀 (7)下列关于糖类和蛋白质的鉴定实验中斐林试剂和双缩脲试剂的叙述，正确的是(　　) A.都是现配现用 B.所用NaOH溶液的质量浓度相同 C.所用CuSO4溶液的质量浓度相同 D.使用的都是碱性环境中的CuSO4