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生物化学实验理论教学课件 第一讲 分光光度计的结构与使用方法 主讲教师：徐文俊 成都大学生物产业学院 2008年6月 教学目的： 几个基本概念： 教学内容： 1. 分光光度法定义与应用 2. 分光光度计的基本结构和工作原理 2.1 分光光度计的分类 2.2 分光光度计工作原理 2.2.1 分光光度计的光谱范围 2.2.2 物质的吸收光谱（1） 2.2.2 物质的吸收光谱（2） 2.2.3 物质吸光度（A）与透射比（T）的关系 2.2.4 Lambert -Beer定律（ A = εcl） 2.3 分光光度计的基本结构 分光光度计的基本部件（1）: 分光光度计的基本部件（2）: 棱镜与光栅 棱镜单色器装置示意图 检测器---光电池 检测器---光电管 检测器---光电倍增管 2.4 分光光度法的测量误差 2.4.1 仪器测量误差 2.4.2 测量条件选择 2.5 显色反应及其影响因素 2.5.1 显色反应一般要求 2.5.2 影响显色反应的主要因素 3. 7200型分光光度计的正确使用方法 3.1.1 7200型分光光度计仪器结构 3.1.2 7200型分光光度计工作原理（图） 3.1.2 7200型分光光度计工作原理（文） 3.1.3 特点 3.2 7200型分光光度计使用方法（基本操作 1） 3.2 7200型分光光度计使用方法（基本操作2） 3.2 7200型分光光度计使用方法（浓度测定） 3.3 7200型光栅分光光度计的使用注意事项（1） 3.3 7200型光栅分光光度计的使用注意事项（2） 4. UV-754型紫外-可见分光光度计正确使用方法 4.1 紫外分光光度计法概述（1） 4.1 紫外分光光度计法概述（2） 4.2 UV-754型分光光度计的结构和工作原理 4.2.2 工作原理（图） 4.2.2 工作原理（文） 4.3 UV-754型分光光度计使用方法（外型） 4.3 UV-754型分光光度计使用方法（键盘） 4.3 UV-754型分光光度计使用方法（键盘内容1） 4.3 UV-754型分光光度计使用方法（键盘内容2） 4.3.2 UV-754型紫外可见分光光度计使用方法（1） 4.3.2 UV-754型紫外可见分光光度计使用方法（2） 4.4 UV—754型紫外—可见分光光度计注意事项 思考题： （1） 具有低杂色光，高分辩率的单光束光路结构的单色器； （2） 具有良好的稳定性，重现性和精确的测量读数； （3） 明亮清晰的数字显示器可显示透射比，吸光度，浓度和所设置的波长，提高了仪器的读数准确性； （4） 采用最新微机处理技术，仪器具有自动设置0%T和100%等控制功能； （5） 仪器配有标准的RS-232双向通讯接口，不仅可向计算机发送测试参数，还可接收计算机发出的指令。 （6） 在已知标准溶液浓度前提下，测定未知样品浓度； （7）在已知标准溶液浓度斜率前提下，测定未知样品浓度。 3.2.1 基本操作 （1）通电---仪器自检----预热20min； （2）用MODE键设置测试方式：透射比（T），吸光度（A），已知标样浓度方式（C）和已知标样浓度斜率（K）方式； （3）波长选择：用波长调节旋钮设置所需的单色光波长; （4）放样顺序：打开样品室盖，在1~4号放置比色皿槽中，依次放入%T校具（黑体），参比液，样品液1和样品液2。 （